緒論一、發(fā)酵工程實(shí)驗(yàn)的特點(diǎn)(一)發(fā)酵工程實(shí)驗(yàn)的目的和要求(二)實(shí)驗(yàn)室的一般要求二、發(fā)酵工程實(shí)驗(yàn)室的特點(diǎn)與要求(一)發(fā)酵工程實(shí)驗(yàn)的特點(diǎn)(二)發(fā)酵工程實(shí)驗(yàn)的要求(三)發(fā)酵工程實(shí)驗(yàn)室的安排三、發(fā)酵工程實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)(方案)的基本步驟(一)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)(方案)的內(nèi)容及要求(二)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)(方案)的擬定步驟(三)數(shù)據(jù)回歸分析四、發(fā)酵工程實(shí)驗(yàn)常用的設(shè)備(一)搖瓶(二)搖床(三)發(fā)酵罐**部分 基本技能實(shí)驗(yàn)**章 菌種改造**節(jié) 菌種分離純化和自然選育第二節(jié) 微生物的誘變育種(一)誘變育種步驟(二)物理誘變與化學(xué)誘變第三節(jié) 富集培養(yǎng)技術(shù)在育種中的應(yīng)用(一)抗性突變株的富集(二)營養(yǎng)缺陷型的富集第四節(jié) 原生質(zhì)體育種(一)標(biāo)記菌株的篩選(二)原生質(zhì)體的制備(三)原生質(zhì)體的再生(四)原生質(zhì)體的融合(五)融合子的選擇實(shí)驗(yàn)一 菌種的分離純化實(shí)驗(yàn)二 紫外誘變實(shí)驗(yàn)三 微波誘變實(shí)驗(yàn)四 亞硝基胍誘變實(shí)驗(yàn)五 噬菌體的分離和測定實(shí)驗(yàn)六 抗噬菌體菌種選育實(shí)驗(yàn)七 氨基酸抗反饋調(diào)節(jié)突變株的選育實(shí)驗(yàn)八 大腸桿菌營養(yǎng)缺陷型的篩選實(shí)驗(yàn)九 原生質(zhì)體制備及再生實(shí)驗(yàn)十 原生質(zhì)體融合第五節(jié) 基因組改組技術(shù)第六節(jié) 微生物基因工程技術(shù)及其在微生物種中的應(yīng)用(一)目的基因的獲取(二)克隆載體的選擇與構(gòu)建(三)外源基因與載體的連接(四)重組DNA導(dǎo)人受體細(xì)胞(五)重組體的篩選(六)克隆基因的表達(dá)(七)PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因?qū)嶒?yàn)十一 基因組改組技術(shù)篩選蛋白酶高產(chǎn)菌株實(shí)驗(yàn)十二 基因組DNA的提取實(shí)驗(yàn)十三 煮沸法快速提取質(zhì)粒DNA實(shí)驗(yàn)十四 堿裂解法抽提質(zhì)粒DNA與鑒定實(shí)驗(yàn)十五 DNA的限制性內(nèi)切酶消化實(shí)驗(yàn)十六 瓊脂糖電泳檢測DNA實(shí)驗(yàn)十七 PCR技術(shù)擴(kuò)增枯草桿菌deoD基因?qū)嶒?yàn)十八 重組T質(zhì)粒的構(gòu)建實(shí)驗(yàn)十九 感受態(tài)的制備和轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)二十 重組質(zhì)粒的鑒定——菌落PCR第二章 培養(yǎng)基配制與滅菌**節(jié) 培養(yǎng)基的配制(一)微生物的營養(yǎng)需求及對物質(zhì)的吸收(二)培養(yǎng)基(三)培養(yǎng)基的配制第二節(jié) 高壓蒸汽滅菌(一)滅菌與消毒的基本概念(二)高壓蒸汽滅菌的原理(三)高壓滅菌設(shè)備實(shí)驗(yàn)二十一 培養(yǎng)基的配制實(shí)驗(yàn)二十二 高壓滅菌鍋的使用第三章 搖瓶發(fā)酵**節(jié) 發(fā)酵原理(一)營養(yǎng)(二)溫度(三)pH(四)溶氧第二節(jié) 搖瓶發(fā)酵實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)二十三 接種工具的認(rèn)識與滅菌實(shí)驗(yàn)二十四 接種和移種實(shí)驗(yàn)二十五 枯草芽孢桿菌生產(chǎn)腺苷實(shí)驗(yàn)二十六 重組大腸桿菌羧肽酶的表達(dá)實(shí)驗(yàn)二十七 洛伐他汀發(fā)酵實(shí)驗(yàn)二十八 林可霉素發(fā)酵實(shí)驗(yàn)二十九 四環(huán)素類抗生素定向發(fā)酵實(shí)驗(yàn)三十 半乳糖苷酶生成的調(diào)節(jié)實(shí)驗(yàn)三十一 芽孢桿菌發(fā)酵產(chǎn)堿性蛋白酶第四章 發(fā)酵生化參數(shù)的測定**節(jié) 生化參數(shù)測定原理第二節(jié) 生化參數(shù)分析方法實(shí)驗(yàn)三十二 比濁法測定發(fā)酵液中大腸桿菌濃度實(shí)驗(yàn)三十三 測定菌體干重實(shí)驗(yàn)三十四 紫外分光光度法定量測定細(xì)胞總核酸實(shí)驗(yàn)三十五 紅霉素效價(jià)的化學(xué)法測定一實(shí)驗(yàn)三十六 紅霉素效價(jià)的化學(xué)法測定二實(shí)驗(yàn)三十七 紅霉素生物效價(jià)的測定實(shí)驗(yàn)三十八 二劑量法測定林可霉素生物效價(jià)實(shí)驗(yàn)三十九 利福霉素化學(xué)效價(jià)的測定實(shí)驗(yàn)四十 檸檬酸含量測定一實(shí)驗(yàn)四十一 檸檬酸含量測定二實(shí)驗(yàn)四十二 衣康酸含量測定實(shí)驗(yàn)四十三 丙酮酸含量測定實(shí)驗(yàn)四十四 用SBA-40C型生物傳感分析儀測定谷氨酸和谷氨酰胺實(shí)驗(yàn)四十五 華勃氏呼吸儀測定谷氨酸的量實(shí)驗(yàn)四十六 雙縮脲法測定蛋白質(zhì)含量實(shí)驗(yàn)四十七 Folin-酚法測定蛋白質(zhì)濃度實(shí)驗(yàn)四十八 考馬斯亮藍(lán)法測定蛋白質(zhì)濃度實(shí)驗(yàn)四十九 SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(PAGE)檢測蛋白表達(dá)和測定蛋白質(zhì)相對分子質(zhì)量實(shí)驗(yàn)五十 發(fā)酵液中糖含量的測定實(shí)驗(yàn)五十一 DNS法測定還原糖濃度實(shí)驗(yàn)五十二 酶試劑盒法測定葡萄糖含量實(shí)驗(yàn)五十三 SBA-40型谷氨酸(乳酸)-葡萄糖雙功能分析儀測定葡萄糖含量實(shí)驗(yàn)五十四 發(fā)酵液氮含量的測定實(shí)驗(yàn)五十五 靛酚藍(lán)法測定銨離子實(shí)驗(yàn)五十六 鉬酸銨法測定無機(jī)磷實(shí)驗(yàn)五十七 還原法測定無機(jī)磷實(shí)驗(yàn)五十八 鉬釩法測定無機(jī)磷實(shí)驗(yàn)五十九 無細(xì)胞抽提液的制備實(shí)驗(yàn)六十 葡萄糖激酶的酶活測定實(shí)驗(yàn)六十一 磷酸果糖激酶的測定實(shí)驗(yàn)六十二 異檸檬酸脫氫酶活力測定實(shí)驗(yàn)六十三 6-磷酸葡萄糖脫氫酶的測定實(shí)驗(yàn)六十四 丙酮酸激酶活力測定實(shí)驗(yàn)六十五 檸檬酸合成酶活力測定實(shí)驗(yàn)六十六 堿性磷酸酶(AKP)酶活測定實(shí)驗(yàn)六十七 脂肪酶活力測定實(shí)驗(yàn)六十八 堿性蛋白酶活力測定實(shí)驗(yàn)六十九 酰基激酶活力的測定實(shí)驗(yàn)七十 酰基CoA合成酶活力的測定第五章 色譜分析在發(fā)酵工程中的應(yīng)用**節(jié) 色譜分析概述(一)氣相色譜法的特點(diǎn)(二)氣相色譜分離條件的選擇(三)液相色譜法的特點(diǎn)(四)高效液相色譜分析方法的建立第二節(jié) 色譜法在發(fā)酵工程中的應(yīng)用(一)反相HPLC雙檢測器法同時(shí)測定發(fā)酵液中的有機(jī)酸與葡萄糖(二)AQC柱前衍生高效液相色譜法測定發(fā)酵液中21種氨基酸(三)利用反相高效液相色譜法測定發(fā)酵液中的生物素含量(四)利用乙腈作為內(nèi)標(biāo)氣相色譜法快速測定發(fā)酵液中的乳酸第六章 過程工程參數(shù)測定**節(jié) 微生物反應(yīng)器的混合原理第二節(jié) 微生物反應(yīng)器的氧傳遞過程原理實(shí)驗(yàn)七十一 亞硫酸鈉氧化法測定氧傳遞系數(shù)K1a實(shí)驗(yàn)七十二 用溶氧電極法的動態(tài)法測定氧傳遞系數(shù)K1a實(shí)驗(yàn)七十三 混合時(shí)間測定第二部分 綜合實(shí)驗(yàn)第七章 微生物培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)一 聚賴氨酸生產(chǎn)菌株的選育與發(fā)酵工藝的研究實(shí)驗(yàn)二 D-核糖發(fā)酵實(shí)驗(yàn)三 重組大腸桿菌發(fā)酵人銅鋅超氧化物歧化酶的高密度、高表達(dá)實(shí)驗(yàn)四 黑曲霉產(chǎn)纖維素酶液體發(fā)酵實(shí)驗(yàn)五 擬干酪乳桿菌發(fā)酵生產(chǎn)乳酸實(shí)驗(yàn)六 嘌呤核苷磷酸化酶在大腸桿菌中表達(dá)和酶學(xué)性質(zhì)測定實(shí)驗(yàn)七 酶催化蔗糖轉(zhuǎn)化反應(yīng)實(shí)驗(yàn)八 酵母培養(yǎng)中的基質(zhì)代謝、呼吸和生長的參數(shù)檢測與參數(shù)相關(guān)分析實(shí)驗(yàn)九 酵母菌厭氧乙醇發(fā)酵實(shí)驗(yàn)十 重組畢赤酵母高密度發(fā)酵表達(dá)植酸酶及其分離純化第八章 動物細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)十一 造血細(xì)胞分離、集落培養(yǎng)及表型分析實(shí)驗(yàn)十二 動物細(xì)胞的培養(yǎng)和計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)十三 細(xì)胞的冷凍和復(fù)蘇參考文獻(xiàn)