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分子生物學實驗技術 版權信息
- ISBN:9787030744739
- 條形碼:9787030744739 ; 978-7-03-074473-9
- 裝幀:平裝
- 冊數:暫無
- 重量:暫無
- 所屬分類:>>
分子生物學實驗技術 內容簡介
分子生物學技術發展迅速,使得在分子水平解析生命現象、生命本質成為可能。該教材聚焦新近分子生物學技術進展編寫而成。全書包括七章:**章CRISPR/Cas9技術,包括基因編輯的概述、sgRNA的克隆與鑒定;第二章基因轉錄調控分析,包括啟動子分析、轉錄因子的鑒定和表觀遺傳調控;第三章非編碼RNA分析,涉及相關的生物信息分析及功能分析;第四章單細胞技術,簡述單細胞技術的原理及其應用;
分子生物學實驗技術 目錄
章 CRISPR/Cas9技術 1概述 1實驗1-1 小向導RNA(sgRNA)設計與載體構建 5實驗1-2 重組質粒的轉化和單克隆篩選鑒定 14實驗1-3 重組質粒抽提和鑒定 17實驗1-4 細胞轉染及陽性克隆鑒定 18實驗1-5 基因編輯效率檢測 21實驗1-6 逆轉錄定量PCR(RT-qPCR)檢測目標基因表達 24實驗1-7 蛋白質印跡法(Western blotting)檢測目標蛋白的表達 28第二章 基因轉錄調控分析 31概述 31實驗2-1 雙螢光素酶報告基因檢測 36實驗2-2 染色質免疫沉淀PCR(ChIP-PCR) 40實驗2-3 染色質免疫沉淀測序(ChIP-seq) 43實驗2-4 靶標的切割和標記(CUT&Tag)實驗 44實驗2-5 甲醛輔助鑒定調控元件技術 47實驗2-6 單細胞ATAC-seq 49實驗2-7 重亞硫酸鹽全基因組甲基化測序 50第三章 非編碼RNA分析 53概述 53實驗3-1 長非編碼RNA(lncRNA)靶基因預測及功能分析 59實驗3-2 利用在線工具對某一環狀RNA(circRNA)進行初步分析 66實驗3-3 circRNA的RT-qPCR檢測 71實驗3-4 circRNA過表達及驗證 74第四章 單細胞技術 78概述 78實驗4-1 視網膜單細胞懸液制備 84第五章 蛋白質-蛋白質相互作用分析 87概述 87實驗5-1 酵母雙雜交 98實驗5-2 拉下(pull-down)實驗 101實驗5-3 免疫共沉淀 103實驗5-4 熒光共振能量轉移 106第六章 定點誘變與蛋白質翻譯后修飾 108概述 108實驗6-1 PCR 介導的快速定點誘變 113實驗6-2 蛋白質小分子泛素相關修飾物蛋白(SUMO)化位點鑒定 115實驗6-3 蛋白質泛素化檢測——變性免疫沉淀法 116實驗6-4 蛋白質泛素化檢測——鎳NTA 親和層析法 117實驗6-5 蛋白質泛素化檢測——體內TUBEs 法119實驗6-6 蛋白質泛素化檢測——體外檢測法 120第七章 基本生物信息在線工具的使用 122概述 122實驗7-1 GEO 數據下載及差異基因分析 123實驗7-2 利用在線工具對差異基因進行聚類分析 131實驗7-3 蛋白質相互作用網絡的構建和hub基因篩選 132
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