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分子生物學(xué)實驗技術(shù)

包郵 分子生物學(xué)實驗技術(shù)

出版社:科學(xué)出版社出版時間:2023-04-01
開本: 其他 頁數(shù): 144
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分子生物學(xué)實驗技術(shù) 版權(quán)信息

分子生物學(xué)實驗技術(shù) 內(nèi)容簡介

分子生物學(xué)技術(shù)發(fā)展迅速,使得在分子水平解析生命現(xiàn)象、生命本質(zhì)成為可能。該教材聚焦新近分子生物學(xué)技術(shù)進展編寫而成。全書包括七章:**章CRISPR/Cas9技術(shù),包括基因編輯的概述、sgRNA的克隆與鑒定;第二章基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控分析,包括啟動子分析、轉(zhuǎn)錄因子的鑒定和表觀遺傳調(diào)控;第三章非編碼RNA分析,涉及相關(guān)的生物信息分析及功能分析;第四章單細(xì)胞技術(shù),簡述單細(xì)胞技術(shù)的原理及其應(yīng)用;

分子生物學(xué)實驗技術(shù) 目錄

章 CRISPR/Cas9技術(shù) 1概述 1實驗1-1 小向?qū)NA(sgRNA)設(shè)計與載體構(gòu)建 5實驗1-2 重組質(zhì)粒的轉(zhuǎn)化和單克隆篩選鑒定 14實驗1-3 重組質(zhì)粒抽提和鑒定 17實驗1-4 細(xì)胞轉(zhuǎn)染及陽性克隆鑒定 18實驗1-5 基因編輯效率檢測 21實驗1-6 逆轉(zhuǎn)錄定量PCR(RT-qPCR)檢測目標(biāo)基因表達 24實驗1-7 蛋白質(zhì)印跡法(Western blotting)檢測目標(biāo)蛋白的表達 28第二章 基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控分析 31概述 31實驗2-1 雙螢光素酶報告基因檢測 36實驗2-2 染色質(zhì)免疫沉淀PCR(ChIP-PCR) 40實驗2-3 染色質(zhì)免疫沉淀測序(ChIP-seq) 43實驗2-4 靶標(biāo)的切割和標(biāo)記(CUT&Tag)實驗 44實驗2-5 甲醛輔助鑒定調(diào)控元件技術(shù) 47實驗2-6 單細(xì)胞ATAC-seq 49實驗2-7 重亞硫酸鹽全基因組甲基化測序 50第三章 非編碼RNA分析 53概述 53實驗3-1 長非編碼RNA(lncRNA)靶基因預(yù)測及功能分析 59實驗3-2 利用在線工具對某一環(huán)狀RNA(circRNA)進行初步分析 66實驗3-3 circRNA的RT-qPCR檢測 71實驗3-4 circRNA過表達及驗證 74第四章 單細(xì)胞技術(shù) 78概述 78實驗4-1 視網(wǎng)膜單細(xì)胞懸液制備 84第五章 蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用分析 87概述 87實驗5-1 酵母雙雜交 98實驗5-2 拉下(pull-down)實驗 101實驗5-3 免疫共沉淀 103實驗5-4 熒光共振能量轉(zhuǎn)移 106第六章 定點誘變與蛋白質(zhì)翻譯后修飾 108概述 108實驗6-1 PCR 介導(dǎo)的快速定點誘變 113實驗6-2 蛋白質(zhì)小分子泛素相關(guān)修飾物蛋白(SUMO)化位點鑒定 115實驗6-3 蛋白質(zhì)泛素化檢測——變性免疫沉淀法 116實驗6-4 蛋白質(zhì)泛素化檢測——鎳NTA 親和層析法 117實驗6-5 蛋白質(zhì)泛素化檢測——體內(nèi)TUBEs 法119實驗6-6 蛋白質(zhì)泛素化檢測——體外檢測法 120第七章 基本生物信息在線工具的使用 122概述 122實驗7-1 GEO 數(shù)據(jù)下載及差異基因分析 123實驗7-2 利用在線工具對差異基因進行聚類分析 131實驗7-3 蛋白質(zhì)相互作用網(wǎng)絡(luò)的構(gòu)建和hub基因篩選 132
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