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醫(yī)學生物學實驗教程(第2版) 版權(quán)信息
- ISBN:9787565926587
- 條形碼:9787565926587 ; 978-7-5659-2658-7
- 裝幀:一般膠版紙
- 冊數(shù):暫無
- 重量:暫無
- 所屬分類:>>
醫(yī)學生物學實驗教程(第2版) 內(nèi)容簡介
本書為首都醫(yī)科大學校本實驗課程教材,在新版教材的編寫中,始終強調(diào)將對基本理論、基本知識、基本技能的學習放在首位。因此,在篇章的安排上,**篇“醫(yī)學生物學實驗基本技術(shù)及原理”和第二篇“基本性實驗”重在打基礎,主要安排基礎性的經(jīng)典驗證性實驗,培養(yǎng)學生掌握扎實的基本理論知識和實踐技能。同時也繼承了原教材多學科整合的特色,從細胞、亞細胞和分子水平三個層次上介紹醫(yī)學生物學實驗的基本方法和實驗技術(shù),為培養(yǎng)學生跨學科運用所學知識的能力打下堅實的基礎。第三篇“設計性實驗”著力培養(yǎng)學生的自主學習能力和科學思維能力,項目設計注重調(diào)動并充分發(fā)揮學生的主觀能動性。第四篇“研究創(chuàng)新性實驗”旨在培養(yǎng)學生的科研創(chuàng)新能力,滿足培養(yǎng)具有創(chuàng)新意識和創(chuàng)新能力的高素質(zhì)醫(yī)學人才的需要。
醫(yī)學生物學實驗教程(第2版) 目錄
目錄
**篇?? 醫(yī)學生物學實驗的基本技術(shù)及其原理 1
**章?? 緒論 2
**節(jié)?? 醫(yī)學生物學實驗課程的學習目的和要求 2
一、學習目的 2
二、學習要求 2
第二節(jié)?? 實驗報告的撰寫 3
一、實驗報告的基本要求 3
二、實驗報告的基本內(nèi)容 3
三、實驗結(jié)果 3
四、分析與討論 4
第三節(jié)?? 實驗室規(guī)章制度 4
一、實驗室安全與防護 4
二、儀器保管及清潔 4
三、試劑使用規(guī)則 4
四、廢棄物處理 5
五、實驗室清潔 5
第二章?? 醫(yī)學生物學實驗常用儀器設備和實驗方法 6
**節(jié)?? 生物化學與分子生物學實驗常用儀器設備與基本操作 6
一、常用儀器設備 6
二、基本操作 6
三、實驗樣品的制備 8
第二節(jié)?? 生物化學常用實驗方法及基本原理 9
一、分光光度法 9
二、層析法 10
三、電泳法 11
四、離心分離技術(shù) 13
第三節(jié)?? 分子生物學常用實驗方法及基本原理 14
一、PCR 技術(shù) 14
二、印跡技術(shù) 15
三、核酸分子雜交技術(shù) 17
四、重組 DNA 技術(shù) 17
第四節(jié)?? 細胞生物學與遺傳學實驗常用儀器和基本操作 21
一、顯微鏡的結(jié)構(gòu)和使用 21
二、細胞培養(yǎng)室的設置要求、儀器設備和無菌操作技術(shù) 26
三、細胞培養(yǎng)用液的配制與消毒 29
四、器皿的清洗和消毒 33
第五節(jié)?? 細胞生物學常用實驗方法及基本原理 35
一、細胞形態(tài)結(jié)構(gòu)的觀察方法 35
二、細胞組分的分析方法 38
三、流式細胞分析技術(shù) 38
四、細胞培養(yǎng)技術(shù) 39
第六節(jié)?? 醫(yī)學遺傳學常用實驗方法及基本原理 39
一、染色體的制備與分析技術(shù) 39
二、人類遺傳病的分子生物學診斷技術(shù) 40
第七節(jié)?? 組學研究技術(shù)及醫(yī)學生物信息學分析 41
一、組學研究技術(shù) 41
二、醫(yī)學生物信息學分析 46
第二篇?? 基本性實驗 51
第三章?? 細胞形態(tài)與功能和亞細胞組分觀察分析 52
**節(jié)?? 細胞培養(yǎng)的基本方法 52
一、細胞的原代培養(yǎng) 52
????實驗 1 雞胚成纖維細胞的原代細胞培養(yǎng) 53
????實驗 2 小鼠骨髓基質(zhì)細胞的體外原代培養(yǎng) 55
二、細胞的傳代培養(yǎng) 56
????實驗 1 貼壁細胞的傳代培養(yǎng) 57
????實驗 2 懸浮細胞的傳代培養(yǎng) 58
三、培養(yǎng)細胞的增殖能力測定 59
????實驗 體外培養(yǎng)細胞的計數(shù)與細胞活性鑒別 59
第二節(jié)?? 細胞和亞細胞組分觀察分析及細胞功能測定的實驗方法 61
一、細胞形態(tài)和細胞分裂的觀察 61
????實驗 1 細胞標本的制備與形態(tài)觀察 61
????實驗 2 細胞有絲分裂的觀察 62
二、亞細胞組分的分離及觀察鑒定方法 64
????實驗 亞細胞組分的分離及觀察鑒定 64
三、應用熒光染色法觀察分析亞細胞組分 66
實驗 1 熒光染色法顯示培養(yǎng)細胞的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)分布 66
實驗 2 熒光染色法顯示培養(yǎng)細胞的骨架 - 微絲 67
實驗 3 熒光染色法顯示體外培養(yǎng)細胞內(nèi)的線粒體分布 68
四、細胞功能測定觀察分析的實驗方法 69
實驗 1 細胞增殖的測定 70
實驗 2 Ho.33342 與碘化丙啶熒光雙染顯示凋亡與壞死細胞 71
實驗 3 小鼠腹腔巨噬細胞吞噬現(xiàn)象的觀察 72
第四章?? 生物分子分析實驗方法 74
**節(jié)?? 生物分子在細胞內(nèi)定位與分布的分析方法 74
一、核酸在細胞內(nèi)的分布 74
實驗 DNA 特異顯示法定性分析核酸在細胞內(nèi)的分布 74
二、酶和蛋白質(zhì)在細胞內(nèi)的定位 77
實驗 1 乳酸脫氫酶在細胞內(nèi)定位的分析 77
實驗 2 堿性和酸性蛋白質(zhì)在細胞內(nèi)定位的分析 78
三、糖和脂類在細胞內(nèi)的分布 79
實驗 1 過碘酸希夫反應定性分析糖原在細胞內(nèi)的分布 79
實驗 2 蘇丹黑染色法定性分析脂類在細胞內(nèi)的分布 80
第二節(jié)?? 蛋白質(zhì)的分析實驗方法 81
一、蛋白質(zhì)性質(zhì)的分析 81
實驗 1 蛋白質(zhì)的兩性解離和等電點測定 81
實驗 2 蛋白質(zhì)的變性和沉淀反應 82
二、蛋白質(zhì)含量的測定 85
實驗 1 蛋白質(zhì)含量的 Folin- 酚法測定 85
實驗 2 紫外光吸收法測定蛋白質(zhì)濃度 86
三、蛋白質(zhì)和氨基酸的分離、提取、純化和鑒定 88
實驗 1 離子交換柱層析法分離混合氨基酸 88
實驗 2 醋酸纖維薄膜電泳法分離血清蛋白質(zhì) 89
實驗 3 血清γ球蛋白的初步分離提取 91
實驗 4 血清 γ 球蛋白的精細分離與純度鑒定 93
第三節(jié)?? 核酸的分析實驗方法 98
實驗 紫外分光光度法測定核酸的濃度與純度 98
第四節(jié)?? 酶的分析實驗方法 99
一、酶反應條件的選擇 99
實驗 酶促反應的影響因素 99
二、酶促反應動力學研究 101
實驗 堿性磷酸酶的 K m 值測定 101
三、酶的分離提取及活性測定 104
實驗 堿性磷酸酶的分離提取和比活性測定 104
第五章?? 分子生物學實驗方法 108
**節(jié)?? DNA 的制備與分析方法 108
一、DNA 的制備 108
實驗 1 組織 DNA 的分離、提取和純化 108
實驗 2 培養(yǎng)細胞 DNA 的分離提取 109
二、DNA 的分析 111
實驗 1 瓊脂糖凝膠電泳法分離 DNA 片段 111
實驗 2 核酸分子探針標記與雜交實驗 113
第二節(jié)?? 基因表達分析方法 118
一、RNA 的制備 118
實驗 動物組織總 RNA 的提取和純化 118
二、在 mRNA 和蛋白質(zhì)水平分析基因表達的方法 120
實驗 1 RT-PCR 法檢測基因的表達 120
實驗 2 蛋白質(zhì)印跡法 121
第三節(jié)?? 基因工程技術(shù) 123
一、載體 DNA 的制備與鑒定 123
實驗 質(zhì)粒 DNA 的快速分離提取和酶切與鑒定 123
二、基因組 DNA 分離提取及目的基因擴增與鑒定 127
實驗 小鼠肝組織基因組 DNA 的分離提取及 p53 基因的擴增與鑒定 127
三、重組 DNA 分子的構(gòu)建、導入和篩選 131
實驗 1 目的基因的純化與回收和重組 DNA 的構(gòu)建 131
實驗 2 重組 DNA 的導入和篩選 133
第六章?? 生物學實驗技術(shù)在醫(yī)學研究中的應用 136
**節(jié)?? 臨床疾病與生物化學特定物質(zhì)的測定 136
一、高脂血癥與血清脂類分析測定 136
實驗 血清甘油三酯、總膽固醇和 HDL- 膽固醇的定量測定 136
二、糖尿病與血糖濃度分析測定 141
實驗 血糖濃度的定量測定 142
三、肝疾病與血清酶活性的分析測定 145
實驗 血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性測定 145
四、腎功能異常與血清尿素氮的分析測定 147
實驗 血清尿素氮含量的測定 147
第二節(jié)?? 染色體標本制備與核型分析 149
一、正常和異常染色體的識別與鑒定 149
實驗 1 小鼠骨髓細胞染色體標本的制備與觀察 149
實驗 2 人體外周血淋巴細胞培養(yǎng)及染色體標本的制備 151
實驗 3 人類染色體顯帶技術(shù) 153
實驗 4 正常人類染色體核型分析及人類異常染色體的識別 154
二、環(huán)境誘發(fā)染色體畸變的檢測 159
實驗 小鼠骨髓細胞微核檢測技術(shù) 159
第三節(jié)?? 單核苷酸多態(tài)性及分子遺傳標記的應用 161
實驗 1 乙醛脫氫酶多態(tài)性位點 rs671 基因分型及其群體遺傳學數(shù)據(jù)分析 161
實驗 2 分子遺傳標記微衛(wèi)星 DNA 在個體識別中的應用 163
第四節(jié)?? 生物學實驗技術(shù)在腫瘤研究中的應用 166
一、腫瘤細胞的集落培養(yǎng)與細胞中物質(zhì)的測定 166
實驗 腫瘤細胞集落形成率和細胞中總蛋白質(zhì)含量的測定 166
二、基因檢測技術(shù)在臨床腫瘤診斷治療中的應用 169
實驗 ARMS-PCR 法檢測腫瘤基因突變 170
三、腫瘤細胞的異常染色體識別與檢測 172
實驗 腫瘤細胞染色體熒光原位雜交技術(shù) 172
第三篇?? 設計性實驗175
第七章?? 實驗的設計與實施 176
實驗 1 一種酶的分離、純化與鑒定 176
實驗 2 缺氧導致的動物腦組織生物化學異常改變 176
實驗 3 化學物質(zhì)對細胞的作用 179
實驗 4 細胞膜性成分的形態(tài)及分布依賴于細胞骨架的實驗驗證 179
實驗 5 基因表達影響腫瘤細胞表型變化的檢測分析 180
第四篇?? 研究創(chuàng)新性實驗181
第八章?? 蛋白質(zhì)功能研究常用技術(shù) 183
**節(jié)?? 細胞蛋白質(zhì)的含量測定 183
實驗 蛋白質(zhì)含量的 BCA 法測定 183
第二節(jié)?? 蛋白質(zhì) - 蛋白質(zhì)相互作用研究技術(shù) 184
實驗 免疫共沉淀 184
第三節(jié)?? 蛋白質(zhì) - 核酸相互作用研究技術(shù) 187
實驗 1 電泳遷移阻滯實驗 187
實驗 2 染色質(zhì)免疫沉淀 191
第九章?? 基因功能研究技術(shù) 193
實驗 1 真核細胞基因的過表達 193
實驗 2 應用小干擾 RNA 抑制基因表達 194
實驗 3 實時熒光定量 PCR 檢測基因的表達 196
附錄199
中英文專業(yè)詞匯索引201
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