中圖網小程序
一鍵登錄
更方便
>
《生物化學技術原理及應用》要點解析
本類五星書更多>
-
>
貨幣大歷史:金融霸權與大國興衰六百年
-
>
(精)方力鈞作品圖錄
-
>
《藏書報》2021合訂本
-
>
(精)中國當代書畫名家作品集·范碩:書法卷+繪畫卷(全2卷)
-
>
(噴繪樓閣版)女主臨朝:武則天的權力之路
-
>
書里掉出來一只狼+狼的故事-全2冊
-
>
奇思妙想創意玩具書(精裝4冊)
《生物化學技術原理及應用》要點解析 版權信息
- ISBN：9787030303325
- 條形碼：9787030303325 ; 978-7-03-030332-5
- 裝幀：暫無
- 冊數：暫無
- 重量：暫無
- 所屬分類：
《生物化學技術原理及應用》要點解析 內容簡介
本書所選內容及章節安排主要依據《生物化學技術原理及應用（第四版）》。作者從解題思路切入，對部分要點、難點及思考題進行深度解析；對"生物化學技術原理及應用"書中具有普遍意義的論述進一步豐富與完善；對"生物化學技術"用全局觀點看待，既要了解生物化學技術的每個方法的原理、特點，又要分析每個方法與其他方法的配合銜接是否合理、協調。從而使讀者更好的掌握如何獲取相關知識的方法和想要得到的答案，使他們在讀書過程中深入地學習"生物化學技術原理及應用"一書中的生命大分子物質的純化和鑒定過程中的基本原理，認識純化與鑒定之間的關聯與區別，領會正文與思考題直接的內在聯系和互補作用。
《生物化學技術原理及應用》要點解析 目錄
目錄
前言
**章 生命大分子物質的制備 1
【典型例題】1
【各類題型】3
【簡明答案】7
第二章 沉淀法 11
【典型例題】11
【各類題型】14
【簡明答案】16
第三章 吸附層析法 19
【典型例題】19
【各類題型】21
【簡明答案】24
第四章 疏水層析 28
【典型例題】28
【各類題型】30
【簡明答案】31
第五章 離子交換層析 33
【典型例題】33
【各類題型】37
【簡明答案】40
第六章 凝膠過濾 43
【典型例題】43
【各類題型】45
【簡明答案】47
第七章 親和層析 51
【典型例題】51
【各類題型】53
【簡明答案】56
第八章 聚焦層析 60
【典型例題】60
【各類題型】62
【簡明答案】63
第九章 高效液相色譜 66
【典型例題】66
【各類題型】69
【簡明答案】70
第十章 固定化酶與微生物 73
【典型例題】73
【各類題型】75
【簡明答案】77
第十一章 標記 79
【典型例題】79
【各類題型】80
【簡明答案】83
第十二章 重組DNA 89
【典型例題】89
【各類題型】90
【簡明答案】92
第十三章 DNA序列測定 97
【典型例題】97
【各類題型】99
【簡明答案】100
第十四章 生物芯片 105
【典型例題】105
【各類題型】106
【簡明答案】108
第十五章 聚合酶鏈反應 111
【典型例題】111
【各類題型】112
【簡明答案】113
第十六章 細胞凋亡的檢測 117
【典型例題】117
【各類題型】118
【簡明答案】119
第十七章 生物傳感器 122
【典型例題】122
【各類題型】123
【簡明答案】124
第十八章 電泳 127
【典型例題】127
【各類題型】128
【簡明答案】132
第十九章 免疫分析 140
【典型例題】140
【各類題型】144
【簡明答案】148
第二十章 氣相色譜 155
【典型例題】155
【各類題型】157
【簡明答案】160
附錄 164
試卷一 164
試卷二 165
試卷三 167
試卷四 170
試卷五 172
試卷六 174
試卷一答案 176
試卷二答案 177
試卷三答案 179
試卷四答案 182
試卷五答案 184
試卷六答案 187
前言
**章 生命大分子物質的制備 1
【典型例題】1
【各類題型】3
【簡明答案】7
第二章 沉淀法 11
【典型例題】11
【各類題型】14
【簡明答案】16
第三章 吸附層析法 19
【典型例題】19
【各類題型】21
【簡明答案】24
第四章 疏水層析 28
【典型例題】28
【各類題型】30
【簡明答案】31
第五章 離子交換層析 33
【典型例題】33
【各類題型】37
【簡明答案】40
第六章 凝膠過濾 43
【典型例題】43
【各類題型】45
【簡明答案】47
第七章 親和層析 51
【典型例題】51
【各類題型】53
【簡明答案】56
第八章 聚焦層析 60
【典型例題】60
【各類題型】62
【簡明答案】63
第九章 高效液相色譜 66
【典型例題】66
【各類題型】69
【簡明答案】70
第十章 固定化酶與微生物 73
【典型例題】73
【各類題型】75
【簡明答案】77
第十一章 標記 79
【典型例題】79
【各類題型】80
【簡明答案】83
第十二章 重組DNA 89
【典型例題】89
【各類題型】90
【簡明答案】92
第十三章 DNA序列測定 97
【典型例題】97
【各類題型】99
【簡明答案】100
第十四章 生物芯片 105
【典型例題】105
【各類題型】106
【簡明答案】108
第十五章 聚合酶鏈反應 111
【典型例題】111
【各類題型】112
【簡明答案】113
第十六章 細胞凋亡的檢測 117
【典型例題】117
【各類題型】118
【簡明答案】119
第十七章 生物傳感器 122
【典型例題】122
【各類題型】123
【簡明答案】124
第十八章 電泳 127
【典型例題】127
【各類題型】128
【簡明答案】132
第十九章 免疫分析 140
【典型例題】140
【各類題型】144
【簡明答案】148
第二十章 氣相色譜 155
【典型例題】155
【各類題型】157
【簡明答案】160
附錄 164
試卷一 164
試卷二 165
試卷三 167
試卷四 170
試卷五 172
試卷六 174
試卷一答案 176
試卷二答案 177
試卷三答案 179
試卷四答案 182
試卷五答案 184
試卷六答案 187
展開全部
《生物化學技術原理及應用》要點解析 節選
**章生命大分子物質的制備 本章立意，主要是從深刻認識和理解自然界生物，如動物、植物與微生物等的多樣性與復雜性出發，進而從構成這些生物的蛋白質（包括酶）、核酸、糖類、激素等大分子物質普遍性和特殊性考慮，*后了解并制定出從諸多生物材料中制備生命/生物大分子物質的概述和策略。 生命大分子物質的普遍性是：結構復雜、分子質量大；制備過程（離體后）穩定性較差；有些物質，如酶含量較低；欲制備的生命大分子物質（即有效成分）常與其他物質（即雜質）盤根錯節組成不易分離的有機整體等。而這些生命大分子物質的特殊性是：結構、組成與含量變化多端，如同種不同屬不一樣，同種不同部位有差異，同種同一部位不同生長期有區別，同種生長于不同環境（地域）不一致等，從而導致制備方法的通用性較差。 制備（或稱提取、純化，也有人稱下游工程）生命大分子物質的概述和策略是：起步時一定要認真分析所用生物原材料的特點、欲制備生命大分子物質的性質和結構，冷靜權衡利弊，深人理解、比較可采用的各種分離方法的原理和用途。本著先采取粗放、快速、有利于縮小樣品體積和簡化后工序的手段，后使用精確、費時和需要樣品量少的方法的原則，經過反復試驗、修改、評價，才能逐步合理、巧妙地建立一種由數個方法構成的既好又快制備生命大分子物質的有效方案。 為了讓讀者，特別是年輕學生有章可循，我們歸納出以下制備生命大分子物質的關鍵操作步驟：材料的選擇與處理；測定方法的建立；有效成分的抽提；粗制品的純化和純品的鑒定。照此辦理，定可取得預期結果。本章要點：①建立專一、快速和靈敏的測定方法。②影響抽提有效成分的八大因子。③根據有效成分和雜質理化性質的差異性，設計適當純化方案并對其進行評價。 【典型例題】 1.多項選擇題 胰島素含量的測定方法有（），較精確的方法是（）。 A.光譜法（紫外分光光度法） B.電化學法 C.免疫分析法 D.生物活性法 知識概略 （1）光譜法。光譜法測定蛋白質含量的原理是：因大部分蛋白質均含有帶芳香環的酪氨酸、色氨酸，而酪氨酸和色氨酸在280nm附近有*大吸收值。因此，大多數蛋白質在此光波附近顯示強吸收性能，其值大小可用吸光值（A280）表示。利用這個性質，可定性、定量測定蛋白質。 （2）電化學法。有些化學反應過程會放出質子氫（H+），可用靈敏的pH計或NaOH溶液滴定等方法追蹤其變化，從而計算出欲測物的含量或活力。例如，葡萄糖氧化酶能催化葡萄糖氧化成葡萄糖酸，用NaOH溶液滴定該酸的含量，便可求出葡萄糖氧化酶的活力。 （3）免疫分析法。在有胰島素抗體的前提下，可利用該抗體與待測胰島素之間發生特異反應的性質，結合核素或非核素標記，就可對胰島素進行靈敏的定量分析。 。4）生物活性法。胰島素是一類可降低機體血糖的肽類物質，其含量變化與有機體降低血糖的程度成正比。其量可用小鼠驚厥法、家兔血糖降低法和放射受體分析法進行測定。該法專一性強，但操作繁瑣。 解題思路 依據知識概略（2），因胰島素不屬于酶類物質，可將B法排除在外。依據知識概略（1）、（3）和（4），因胰島素是由氨基酸（包括色氨酸和酪氨酸）組成，并且是有生物活性的物質，也可通過胰島素標準品制備出抗體，故可用光譜法、免疫分析法和生物活性法進行測定。光譜法靈敏、快速，而免疫分析法和生物活性法則均較專一。 簡明答案 測定方法可以選擇A、C和D;而較精確的方法應選擇C和D。 2.單項選擇題 在用適當的溶液對有效成分進行抽提時，選擇抽提液的pH應是（）。 A.偏離其等電點的范圍B.等同其等電點的范圍 C.偏離其等電點的穩定范圍D.酸性pH E.喊性pH知識概略 （1）蛋白質（包括酶）和核酸的溶解度及穩定性均與pH有關； （2）蛋白質（或酶）是具有等電點的兩性電解質物質，當它所處緩沖溶液的pH與其等電點相同時溶解度*低； 。3）不同結構的物質，處在各種pH環境中的溶解度和穩定程度是不相同的； 。4）一般選擇抽提液的pH應在偏離其等電點的穩定范圍內，這樣既能增加有效成分的溶解度，又能保持其活性。通常抽提堿性蛋白質宜選用低pH溶液，而抽提酸性蛋白質則宜選用高pH溶液，或者使用調至一定pH的有機溶液。解題思路 依據知識概略（2），可以排除B;依據知識概略（3）可以排除A、D和E; 又依據知識概略（1）和（4），選擇C是正確的。 簡明答案 C。 3.單項選擇題 根據有效成分和雜質理化性質的差異性，設計出的純化大分子物質方案，欲評價其可行性的方法有（）。 A.回收率B.純化倍數C.純度 D.純化倍數和回收率E.有效成分的結構知識概略 （1）純化方案是指在純化某有效成分時，將兩種或兩種以上能逐步提高純度、去除雜質的方法，有機地優勢互補、靈活調控、聯合運作全過程的總稱。 （2）遴選分離有效成分方法的依據是抽提液中所含有效成分與雜質之間的理化性質的差異性。 。3）純化是為了提高有效成分的純度，但在此期間應既要保持其結構穩定，又能使其活性不變。衡量純化方案可行性的主要指標是被純化物質的回收率和純化倍數。 ①評價純化方案，實際是對組成純化方案中的相關方法的評價。凡是在特定實驗中，能較快增加純化倍數和緩慢降低回收率的方法均有應用價值。 、诩兓稊=每步的比活力/粗抽提液的比活力；純化倍數越高表示該方法去除雜質越多，有效成分的純度提高得越快。 、刍厥章=每步的總活力/粗抽提液的總活力×100%，回收率則視降低的速率而定，通常小于100%。在一般情況下，回收率都小于100%，而且每經過一步純化，有效成分的含量都會有所降低，但降低速率應較緩慢。 。4）評價純化方法的可行性不僅要考慮有效成分的純度（純化倍數），而且還要考慮其回收率。 解題思路 依據知識概略（1）、（2）和（3），評價純化方案可行性時可以排除C、E；依據知識概略（3）、（4），應排除A、B，而D是正確的答案。 簡明答案D。 【各類題型】 一、填空題 1.影響抽提有效成分效果的八大因子是_____、_____、_____、_____、溫度、攪拌、金屬離子和抽提液與抽提物的比例。 2.有效成分是指欲純化的某種_____。而有效成分以外的其他物質稱 3.選擇分離有效成分方法的依據，一般是分析抽提液中所含___理化性質的差異性。 4.在制備生命大分子的過程中，建立測定方法的目的是為了追蹤_____的去向和____。 5.定性和定量測定蛋白質和核酸的光譜法包括_____、____、____，另外還有表觀光譜法-濁度法。 6.蛋白質中在280nm處有*大吸光值的氨基酸殘基是___、____，在260nm處有*大吸光值的是苯丙氨酸。 7.核酸在260nm附近具有*大的吸光值（有*大吸收峰），是因為核酸中含有共軛雙鍵的_____和____。 8.抽提是指采用_，把原材料中有效成分和雜質通過反復萃取，逐步將其有效成分_____地分離、收集的過程。 9.在選擇提取蛋白質或核酸的材料中，往往都存在一些___，能與欲抽提的蛋白質或核酸在一定條件下發生水解反應，從而導致回收率降低，活性喪失。解決的辦法是在提取液中添加適量_____或_______，盡量減少水解酶的作用。 10.對純化方案的評價，實際上是對組成純化方案中的相關方法的評價。凡是在特定實驗中能較快增加____和緩慢降低_____的方法均有應用價值。 11.一個酶活力單位通常是指在一定的條件下，每分鐘轉變_____底物所需的酶量，即一個IU（為國際酶活力單位）。 12.酶的比活力是指每毫克酶蛋白所____，它是酶制劑純度的一個指標。 13.某些物質被一定波長的光照射時，會在特定時間內發射出___波長的光，這種光就稱為熒光。熒光法的精確性、重復性和靈敏度均比____好。 14.將冰凍抽提液置于凍干機中，在真空狀態下可以由__直接變為____的方法稱冰凍干燥法，該法能起濃縮作用。 15.把盛抽提液的透析袋（由半透膜制成）埋在吸水力強的聚乙二醇（polyethylene glycol，PEG，分子質量>20kDa）或甘油中，袋內的_____可透過半透膜逐漸移至_____，有效成分則留在___，抽提液（10ml）可很快（1h）濃縮到幾乎無水程度，此法稱為濃縮透析。例如，將裝有鹽析液的透析袋放在蒸餾水或緩沖液的燒杯中進行透析，可除去小分子鹽的過程也稱透析。 16.將體積比較大的抽提液經__或吸附等方法處理，致使其體積縮小，即為濃縮。 二、判斷題（標出對與錯） 1.在相同條件下，測定相等摩爾濃度的各蛋白質時，所獲得的摩爾消光系數是一致的。（） 2.酶活力單位可以定義為在25°C下，每分鐘轉變1pmol底物所需的酶量。（） 3.適pH與pI（等電點）是酶所具有的基本性質，兩者之間有一定相關性，通常具體數值比較接近或相同。（） 4.一般用于測定酶活力的常用方法是可見分光光度法，較靈敏的方法是同位素標記-分光光度法。（） 5.在制備蛋白酶制劑時，產品的回收率絕對小于100%。（） 三、論述題 1.請解釋酶活力和比活力在酶純化過程中的變化，分別有什么指標意義？ 2.白明膠溶液在280nm幾乎沒有紫外吸收性質，為什么？ 3.在純化膽紅素還原酶的過程中，測定了幾個步驟的酶活力、蛋白質含量、比活力、純化倍數及回收率（表1-1），試分析該純化方案的可行性。 4.動物胰臟中存在胰島素、胰蛋白酶等物質，在提取胰島素時，如何防止胰蛋白酶對其的水解破壞作用？ 5.何謂標準曲線？怎樣繪制標準曲線？如何從標準曲線求得消光系數？又如何利用消光系數求得某物質的含量？ 6.試比較在分離、制備蛋白質和核酸過程中，所用方法的差異性說明了什么。 7.常用于破碎細胞的方法有幾種？破碎細胞的目的何在？ 四、計算題 1.骨骼肌的無細胞粗抽提液每毫升包含蛋白質32mg，在適宜條件下，該抽提液以每分鐘0.14μmol的速率催化一個反應。用硫酸銨沉淀法分離50ml上述抽提液，將硫酸銨飽和度為20%～40%的沉淀物重新溶于10ml溶液中，測得其蛋白質含量為50mg/ml。取該溶液催化一反應，其速度為0.65μmol/min。試計算純化倍數和回收率。 2.2g小白菜葉的抽提液15ml，稀釋20倍后作為樣品液，以牛血清白蛋白為標準品，運用考馬斯亮藍法測定其含量，該樣品液的吸光值（absorbency）為0.5，標準蛋白的消光系數為0.8個A/（100mg ml），計算白菜的蛋白質含量（mg/g）和百分含量。 3.如何精確配制100ml濃度為1mg/ml牛血清白蛋白的生理鹽水溶液。 4.如果某標準物在標準曲線上查得其濃度為1mg/ml時的4=0.65[0.65A/（mg ml）]，如果該物質的分子質量為6.7萬Da，請求出其兩個消光系數（extinctioncoefficient，百分消光系數和摩爾消光系數）。若一個未知樣品溶液的A咖為0.55，求其蛋白質含量是多少？ 5.如何配制0.2mol/L、500ml的磷酸鈉鹽緩沖液（pH5.8）（已知NazHPO4 2H2O和NaH2PO4 H2O的相對分子質量分別為178.05和138.0，據文獻，配制0.2mol/L、pH5.8的溶液時，0.2mol/L的堿鹽和酸鹽之比為8.0：92.0）。 6.某酶制劑2ml內含脂肪10ng、糖20ng、蛋白質25mg，其酶活力相當于市售酶制品（每克含2000酶活力單位）10mg，問某酶制劑的比活力是多少（因酶制劑中脂肪和糖的含量甚微，故在此忽略不計；均以同樣單位下蛋白質含量計算）？ 7.已知DNA260/280值為1.8，RNA260/280值為2.0。今有一不含蛋白質等雜質的核酸純品，其值為1.9，問在1g該樣品中RNA和DNA各含多少克（1個DNA260吸光值相當于53mgDNA，1個RNA^吸光值相當于40μg
書友推薦
- >
我與地壇
- >
自卑與超越
- >
山海經
- >
回憶愛瑪儂
- >
有舍有得是人生
- >
名家帶你讀魯迅:朝花夕拾
- >
人文閱讀與收藏·良友文學叢書:一天的工作
- >
上帝之肋:男人的真實旅程
本類暢銷
