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分子醫學課程群實驗 版權信息
- ISBN：9787030436771
- 條形碼：9787030436771 ; 978-7-03-043677-1
- 裝幀：一般膠版紙
- 冊數：暫無
- 重量：暫無
- 所屬分類：>>
分子醫學課程群實驗 內容簡介
醫學免疫學、生物化學與分子生物學、醫學微生物學、醫學遺傳學是生物醫學領域的前沿領頭學科和醫學教育中重要的基礎主干課程。分子醫學課程群實驗教程以培養學生的綜合素質、實踐能力和創新精神為核心，以交叉融合的實驗教學為紐帶，打破這四門課程的學科界線，進一步梳理四門課程的內在聯系和層次，科學合理的完善各實驗教學模塊的組織和教學內容的有機銜接，形成既適應四門課程各自學科特點、具有自身系統性、科學性，又相互聯系、有機交叉融合的分子醫學基礎課程群實驗內容。
分子醫學課程群實驗 目錄
目錄
**篇 基礎性實驗模塊
**部分 生物化學與分子生物學實驗（1）
實驗一 蛋白質的定量測定（1）
實驗二 溫度對酶活性的影響（6）
實驗三 pH對酶活性的影響（7）
實驗四 激活劑和抑制劑對酶活性的影響（8）
實驗五 酶的競爭性抑制作用（9）
實驗六 磷酸鹽對堿性磷酸酶的抑制作用（11）
實驗七 乳酸脫氫酶活性測定（14）
實驗八 乳酸脫氫酶同工酶分析（15）
實驗九 血糖含量測定（Folin-吳憲氏法）（17）
實驗十 運動對尿中乳酸含量的影響（19）
實驗十一 饑餓、飽食對動物肝糖原含量的影響（20）
實驗十二 血清膽固醇含量測定（氧化一過氧化物酶一終點法）（21）
實驗十三 肝臟中酮體生成作用（23）
實驗十四 血漿脂蛋白瓊脂糖凝膠電泳（24）
實驗十五 血清過氧化脂質（LPO）測定（25）
實驗十六 血清谷-丙轉氨酶（SGPT）活性測定（26）
實驗十七 尿酸含量測定（28）
實驗十八 血清甘油三醋測定（乙酰丙酮顯色法）（29）
實驗十九 血液尿素氮的測定（31）
實驗二十 血清韓測定（33）
實驗二十一 血清無機磷測定（34）
實驗二十二 組織RNA的提取與鑒定（35）
實驗二十三 組織DNA的提取與鑒定（37）
實驗二十四 質粒DNA的提取與酶切（38）
實驗二十五 PCR技術擴增GAPDH基因（40）
實驗二十六 血清苯丙氨酸含量測定（42）
第二部分 醫學免疫學實驗（44）
實驗一 直接凝集反應（44）
實驗二 試管凝集反應（45）
實驗三 ABO血型鑒定與交叉配血（46）
實驗四 補體介導的溶血反應（48）
實驗五 環狀沉淀試驗（49）
實驗六 單向免疫擴散試驗（50）
實驗七 雙向免疫擴散試驗（52）
實驗八 對流免疫試驗（53）
實驗九 巨噬細胞吞噬功能試驗（表皮葡萄球菌吞噬試驗）（55）
實驗十 免疫酶技術——間接ELISA檢測兔抗SRBC抗體（56）
實驗十一 金免疫標記技術——斑點免疫層析試驗（59）
第三部分 醫學微生物學實驗（61）
實驗一 實驗的目的要求及實驗室規則（61）
實驗二 細菌基本形態、基本結構觀察（62）
實驗三 細菌不染色標本觀察法（63）
實驗四 細菌涂片標本的制備及常用染色法（65）
實驗五 細菌的培養及生長現象觀察（72）
實驗六 細菌代謝產物的檢查（75）
實驗七 細菌分布及人體細菌的檢査（79）
實驗八 消毒與滅菌方法（81）
實驗九 細菌藥物敏感性試驗與耐藥性檢測（83）
實驗十 細菌的遺傳變異檢測（84）
實驗十一 化膿性球菌的檢測（87）
實驗十二 腸道桿菌的檢測（91）
實驗十三 厭氧培養法及厭氧芽胞梭菌的檢測（94）
實驗十四 分枝桿菌的培養及分離鑒定（95）
實驗十五 不發酵菌革蘭陰性菌的檢測（97）
實驗十六 支原體、螺旋體、立克次體與衣原體的檢測（99）
實驗十七 真菌的檢測（104）
實驗十八 病毒形態觀察與分離培養技術（110）
實驗十九 病毒的免疫學鑒定與分子生物學鑒定（114）
第四部分 醫學遺傳學實驗（121）
實驗一 人類X染色質標本的制備和觀察（121）
實驗二 人類Y染色質標本的制備和觀察（122）
實驗三 人類外周血淋巴細胞染色體標本的制備（123）
實驗四 人類染色體G顯帶標本的制備和核型分析（125）
實驗五 小鼠骨髓染色體標本的制備（126）
實驗六 人類姐妹染色單體互換標本的制備與觀察（1280）
實驗七 小鼠骨髓嗜多染紅細胞微核的檢測（130）
實驗八 人類基因組DNA提。132）
實驗九 DNA分子的瓊脂糖凝膠電泳技術（135）
實驗十 人類性狀的群體調查和遺傳學分析（136）
實驗十一 人類性狀的群體遺傳平衡檢測（141）
第二篇 綜合性實驗模塊
實驗一 RFLPs分析技術在檢測FV1基因中的應用（146）
實驗二 脂多糖（LPS）對巨噬細胞LDH活性的影響（149）
實驗三 血清7-球蛋白的分離、純化及鑒定（150）
實驗四 免疫血清的制備及抗體的鑒定（153）
實驗五 T淋巴細胞數量及功能的測定（157）
實驗六 I型超敏反應模型的建立及IL-4、IgE的測定（162）
實驗七 幽門螺桿菌感染對胃黏膜上皮的炎性作用（166）
實驗八 結核患者樣本（痰液與血清）中結核分枝桿菌的抗體與核酸檢測（168）
實驗九 尿液中大腸埃希菌的檢測（170）
實驗十 ABO血型的表型和基因型檢測技術（173）
實驗十一 苯丙酮尿癥的實驗室檢測技術（176）
第三篇 設計創新性實驗模塊
實驗一 酵母蔗糖酶分離純化與性質研究（181）
實驗二 乳酸脫氫酶同工酶（LDH）的測定與急性心肌梗死的臨床鑒定（182）
實驗三 利用基因重組技術制備胰島素（182）
實驗四 炎癥性細胞因子在腫瘤微環境中的作用（183）
實驗五 多糖類免疫調節劑對小鼠免疫功能的調節作用（185）
實驗六 靶向人EGFR單克隆抗體的制備（186）
實驗七 濰坊青蘿卜抑制幽門螺桿菌增殖及其炎性作用的研究（187）
實驗八 自然環境中分枝桿菌噬菌體的分離與體外殺菌活性分析（188）
實驗九 大蒜素體外抑菌實驗研究（189）
實驗十 21三體綜合征的臨床診斷和產前診斷方法（190）
實驗十一 慢性進行性肌營養不良癥的分子診斷方法（191）
參考文獻（193）
附錄（196）
附錄一 常用試劑的配制（196）
附錄二 中英文對照（214）
彩圖
**篇 基礎性實驗模塊
**部分 生物化學與分子生物學實驗（1）
實驗一 蛋白質的定量測定（1）
實驗二 溫度對酶活性的影響（6）
實驗三 pH對酶活性的影響（7）
實驗四 激活劑和抑制劑對酶活性的影響（8）
實驗五 酶的競爭性抑制作用（9）
實驗六 磷酸鹽對堿性磷酸酶的抑制作用（11）
實驗七 乳酸脫氫酶活性測定（14）
實驗八 乳酸脫氫酶同工酶分析（15）
實驗九 血糖含量測定（Folin-吳憲氏法）（17）
實驗十 運動對尿中乳酸含量的影響（19）
實驗十一 饑餓、飽食對動物肝糖原含量的影響（20）
實驗十二 血清膽固醇含量測定（氧化一過氧化物酶一終點法）（21）
實驗十三 肝臟中酮體生成作用（23）
實驗十四 血漿脂蛋白瓊脂糖凝膠電泳（24）
實驗十五 血清過氧化脂質（LPO）測定（25）
實驗十六 血清谷-丙轉氨酶（SGPT）活性測定（26）
實驗十七 尿酸含量測定（28）
實驗十八 血清甘油三醋測定（乙酰丙酮顯色法）（29）
實驗十九 血液尿素氮的測定（31）
實驗二十 血清韓測定（33）
實驗二十一 血清無機磷測定（34）
實驗二十二 組織RNA的提取與鑒定（35）
實驗二十三 組織DNA的提取與鑒定（37）
實驗二十四 質粒DNA的提取與酶切（38）
實驗二十五 PCR技術擴增GAPDH基因（40）
實驗二十六 血清苯丙氨酸含量測定（42）
第二部分 醫學免疫學實驗（44）
實驗一 直接凝集反應（44）
實驗二 試管凝集反應（45）
實驗三 ABO血型鑒定與交叉配血（46）
實驗四 補體介導的溶血反應（48）
實驗五 環狀沉淀試驗（49）
實驗六 單向免疫擴散試驗（50）
實驗七 雙向免疫擴散試驗（52）
實驗八 對流免疫試驗（53）
實驗九 巨噬細胞吞噬功能試驗（表皮葡萄球菌吞噬試驗）（55）
實驗十 免疫酶技術——間接ELISA檢測兔抗SRBC抗體（56）
實驗十一 金免疫標記技術——斑點免疫層析試驗（59）
第三部分 醫學微生物學實驗（61）
實驗一 實驗的目的要求及實驗室規則（61）
實驗二 細菌基本形態、基本結構觀察（62）
實驗三 細菌不染色標本觀察法（63）
實驗四 細菌涂片標本的制備及常用染色法（65）
實驗五 細菌的培養及生長現象觀察（72）
實驗六 細菌代謝產物的檢查（75）
實驗七 細菌分布及人體細菌的檢査（79）
實驗八 消毒與滅菌方法（81）
實驗九 細菌藥物敏感性試驗與耐藥性檢測（83）
實驗十 細菌的遺傳變異檢測（84）
實驗十一 化膿性球菌的檢測（87）
實驗十二 腸道桿菌的檢測（91）
實驗十三 厭氧培養法及厭氧芽胞梭菌的檢測（94）
實驗十四 分枝桿菌的培養及分離鑒定（95）
實驗十五 不發酵菌革蘭陰性菌的檢測（97）
實驗十六 支原體、螺旋體、立克次體與衣原體的檢測（99）
實驗十七 真菌的檢測（104）
實驗十八 病毒形態觀察與分離培養技術（110）
實驗十九 病毒的免疫學鑒定與分子生物學鑒定（114）
第四部分 醫學遺傳學實驗（121）
實驗一 人類X染色質標本的制備和觀察（121）
實驗二 人類Y染色質標本的制備和觀察（122）
實驗三 人類外周血淋巴細胞染色體標本的制備（123）
實驗四 人類染色體G顯帶標本的制備和核型分析（125）
實驗五 小鼠骨髓染色體標本的制備（126）
實驗六 人類姐妹染色單體互換標本的制備與觀察（1280）
實驗七 小鼠骨髓嗜多染紅細胞微核的檢測（130）
實驗八 人類基因組DNA提。132）
實驗九 DNA分子的瓊脂糖凝膠電泳技術（135）
實驗十 人類性狀的群體調查和遺傳學分析（136）
實驗十一 人類性狀的群體遺傳平衡檢測（141）
第二篇 綜合性實驗模塊
實驗一 RFLPs分析技術在檢測FV1基因中的應用（146）
實驗二 脂多糖（LPS）對巨噬細胞LDH活性的影響（149）
實驗三 血清7-球蛋白的分離、純化及鑒定（150）
實驗四 免疫血清的制備及抗體的鑒定（153）
實驗五 T淋巴細胞數量及功能的測定（157）
實驗六 I型超敏反應模型的建立及IL-4、IgE的測定（162）
實驗七 幽門螺桿菌感染對胃黏膜上皮的炎性作用（166）
實驗八 結核患者樣本（痰液與血清）中結核分枝桿菌的抗體與核酸檢測（168）
實驗九 尿液中大腸埃希菌的檢測（170）
實驗十 ABO血型的表型和基因型檢測技術（173）
實驗十一 苯丙酮尿癥的實驗室檢測技術（176）
第三篇 設計創新性實驗模塊
實驗一 酵母蔗糖酶分離純化與性質研究（181）
實驗二 乳酸脫氫酶同工酶（LDH）的測定與急性心肌梗死的臨床鑒定（182）
實驗三 利用基因重組技術制備胰島素（182）
實驗四 炎癥性細胞因子在腫瘤微環境中的作用（183）
實驗五 多糖類免疫調節劑對小鼠免疫功能的調節作用（185）
實驗六 靶向人EGFR單克隆抗體的制備（186）
實驗七 濰坊青蘿卜抑制幽門螺桿菌增殖及其炎性作用的研究（187）
實驗八 自然環境中分枝桿菌噬菌體的分離與體外殺菌活性分析（188）
實驗九 大蒜素體外抑菌實驗研究（189）
實驗十 21三體綜合征的臨床診斷和產前診斷方法（190）
實驗十一 慢性進行性肌營養不良癥的分子診斷方法（191）
參考文獻（193）
附錄（196）
附錄一 常用試劑的配制（196）
附錄二 中英文對照（214）
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**篇基礎性實驗模塊 **部分生物化學與分子生物學實驗 實驗一蛋白質的定量測定 【實驗目的】 （1）掌握微量移液器的使用。 （2）掌握分光光度計的使用。 （3）掌握雙縮脲法測定蛋白質含量的原理及操作。 【實驗原理】 1.分光光度分析技術原理分光光度法是以朗伯-比爾（Lambrt-Beer）定律為基礎，建立起來的方法。一束單色光通過有色溶液介質時，由于溶液吸收了一部分光線（光能），通過光的強度（光線的量）會減弱，有色溶液介質厚度越大，濃度越髙透過溶液的單色光強度就越小。 設A為人射光強度，/為透過光強度，c為有色溶液的濃度。通常把+稱為透光度r，若以百分數表示，則稱為百分透光度，透光度的負對數稱為光密度，用d表示，即 （1） 由實驗和積分數據推導證明，當有色溶液的濃度不大時，光密度D與溶液濃度C和溶液厚度L的乘積成正比關系，這種關系稱為朗伯-比爾定律，用數學式表達為 （2） 式中，K為一常數，其大小由溶液的性質和入射光的波長決定。 由上式可知，在其他條件相同時，溶液的濃度越大，或是液層越厚，則溶液對光的吸收越強（密度越大），而透光度則越小，因此，當一單色光通過同一有色物質的兩種不同濃度的溶液時，可得出下列兩式： （3） （4） 在分光分析時，溶液的厚度L是固定的（即比色杯厚度相同），因此，L1=L2，合并（3）（4）即又因為是同一種物質的有色溶液，所以K1=K2，則 求未知濃度C2（C1為標準液濃度） 分光分析的原理是使透過溶液的光照射到光電池或光電管上，使光能轉變為電能，產生電流。電流的大小與透過去的光的強度有關。因此，當產生的電流通過電流計時，由電流計指針在刻度盤上指示的位置，即可讀出標準溶液和未知液的光密度（D）或百分透光度（T）。 2.分光光度計的結構分光光度計的種類和型號繁多，但它們都是由下列基本部件組成： 現將各部件的作用原理及性能討論如下： （1）光源:常用的光源是鎢絲燈，鎢絲燈是常用于可見光區的連續光源（波長區域在320~2500nm）。氘燈是常用于紫外光區（180~375nm）的連續光源。 （2）單色器：將光源發出的連續光譜分解為單色光的裝置稱為單色器，單色器由棱鏡或光柵等色散元件，即狹縫和透鏡等組成。 1）棱鏡:光通過入射狹縫，經準直透鏡成為平行光，然后以一定的角度射到棱鏡上，在棱鏡的兩個界面上發生折射，而發生色散的光經會聚透鏡被聚焦在一個微微彎曲并帶有出射狹縫的表面上，移動棱鏡或出射狹縫的位置，就可使所需波長的光通過狹縫射到試液上。 玻璃棱鏡用于可見光區，石英棱鏡可用于紫外光區、可見光區和近紅外光區。 2）光柵:可采用透射光柵和反射光柵。前者是在一塊玻璃或其他透明材料上刻一系列平行并緊緊相靠的凹槽；后者則是利用前者首先制取復制光柵，然后在其表面上噴涂鋁的薄膜制成，也可在拋光的玻璃表面或金屬表面鍍鋁，然后在鋁表面上刻上大量的平行線制成，光柵的刻線越多，分辨率越高，每單位的刻線越多，色散就越大。 （3）樣品池:樣品池也稱比色皿，按材料可分為玻璃和石英兩大類。玻璃池只能用于可見光區，而石英池可用于紫外光區、可見光區和近紅外光區。為了減少反射損失，使用時樣品池的光學面必須完全垂直于光束方向。 樣品池在使用之前應進行校正，校正方法如下:在樣品池A和B內，分別裝人試液和參比液，測量吸光度。要求標準使前后兩次測定的吸光度差值不能大于10%（^10%）。在校正樣品池時，應多選擇幾個波長測量吸光度，得到的校正值可供以后實驗中使用。 （4）監測系統:監測器的功能是檢測光信號，并將其轉變為電信號。因此要求檢測器對測定波長范圍內的光有快速、靈敏的響應，*重要的是產生的光電流應與照射和其上的光強度成正比。分光光度計常用砸光電池或光電管作檢測器，采用檢流計作讀數裝置，兩者組成監測系統。 3.光度測量的選擇為了使光度分析法有較髙的靈敏度和準確度，除了要注意選擇和控制適當的顯色條件外，還必須注意選擇適當的光度測量條件，主要應考慮以下幾點： （1）人射光波長的選擇:人射光波長應根據吸收曲線，選擇溶液有*大吸收時的波長為宜，因為在此波長處，摩爾吸光系數B值*大，靈敏度較高，同時在此波長處的一較小范圍內，吸光度的變化不大，不會造成對比爾定律的偏離。 如果*大吸收波長不在儀器可測波長范圍內，或干擾物質在此波長處也有強烈的吸收，可選擇非峰值處的波長。但應注意的是，盡可能選擇其e值隨波長變化不太大的區域內的波長。 （2）參比溶液的選擇:光度測量時，常利用參比溶液來調節儀器的零點，以消除由于樣品池及溶劑對人射光的干涉和吸收帶來的誤差。 在實際工作中，當試液、顯色劑及所用的其他試劑在測定波長處無吸收時，可用純溶劑（或蒸飽水）作參比溶液。如果顯色劑無吸收，而待測試液有吸收，則應采用不加顯色劑的待測試液作參比溶液。如果顯色劑和試液均有吸收，可將一份試液加人適當的掩蔽劑，將待測組分掩蔽起來，使之不再與顯色劑作用，然后按操作步驟加入顯色劑及其他試劑，以此作為參比溶液。總之要求制備的參比溶液能盡量使待測溶液的吸光度真正反映待測物質的濃度。 （3）吸光度讀數范圍的選擇:在不同吸光度讀數范圍內讀數也可引入不同程度的誤差，對測定產生影響，一般認為吸光度在0.2~0.8時，測量精度*好。根據朗伯-比爾定律，可以改變樣品池厚度或試液濃度，使吸光度讀數處在適宜的范圍內。 4.雙縮脲法測定蛋白質含量的原理在堿性溶液中，雙縮脲（H2N—CO—NH—CO—NH2）與Cu2+作用形成紫紅色的絡合物，這一反應稱雙縮脲反應。凡分子中含兩個或兩個以上酰胺基（—CO—NH2），或與此相似的基團[如一CH2—NH2CS—NH2C（NH）NH2]的任何化合物，無論這類基團直接相連還是通過一個碳或氮原子間接相連，均可發生上述反應。蛋白質分子含有眾多肽鍵（—C0—NH—），可發生雙縮脲反應，且呈色強度在一定濃度范圍內與肽鍵數量即與蛋白質含量成正比，可用比色法測定蛋白含量。 【材料、試劑與儀器】 （1）材料:血清，100ulTiP頭，試管。 （2）試劑:雙縮脲試劑，蛋白標準液，6mol/LNaOH溶液。 （3）儀器:水浴箱，可見光分光光度計，100ul微量移液器，5ml刻度吸量管。 【步驟與方法】 1.微量移液器的使用與校正微量移液器主要用于多次重復的快速定量移液，可單手操作，十分方便。 （1）微量移液器的分類:取液器可分為兩種:一種是固定容量的，常用的有10u1、20u1、50ul、100uJ、200ul、500ul、1000ul等多種規格；另一種是可調容量的取液器，常用的有0.5~l0ul、10~40ul、20~200ul、100~500u1、200~1000ul等不同規格。 微量移液器下段為可裝卸可更換的吸頭，用微量移液器上方的“推進按鈕”定量采取液體。每種取液器都有其專用的聚丙烯塑料吸頭，吸頭通常是一次性使用，當然也可以超聲清洗后重復使用，而且此種吸頭還可以進行120℃高壓滅菌。 （2）微量移液器的使用：首先，選擇一支量程合適的微量移液器，設定容量值，有些微量移液器通過旋轉按鈕設置容量，有些則通過刻度顯示。若由低值旋轉至高值，則需先超越設定值至少三分之一后再反轉至設定值；若由髙至低，則直接旋轉至設定值即可。 選擇合適的吸頭裝在微量移液器套筒上，稍加扭轉壓緊，使吸頭套緊。否則，移取的液體將少于設定的體積或者液體會往下滴。當裝上一個新吸頭時（或改變吸取的容量值）應預洗吸頭，先輕輕吸打幾次液樣，可消除產生吸液誤差。 吸液時，四指并攏握住微量移液器上部，用拇指按住柱塞桿頂端的按鈕至**停點（圖1-1-1），將微量移液器垂直浸入液面2~3mm，然后緩慢平穩地松開拇指，慢慢吸入液體。停留l~2s（黏性大的溶液可加長停留時間），然后將吸頭提離液面。用吸水紙抹去吸嘴外面可能黏附的液滴。小心勿觸及吸頭口。 放液時，將吸頭口貼到容器內壁并保持10°~40°傾斜，平穩地把按鈕壓到**停點，停l~2s（黏性大的溶液加長停留時間），繼續按壓到第二停點，排出殘余液體。松開按鈕，同時提起微量移液器。按吸頭彈射器除去吸頭（改用不同樣本液體時必須更換吸頭）。 圖1-1-1可調式移液器的結構及持移液器的姿勢 （3）微量移液器的校正:每年至少應檢驗校正2~3次，常用的方法有高鐵氰化鉀法、雙蒸水稱重法、水銀稱重法等。以水稱量法為例:校正時要求室溫20T，按正規操作吸取蒸餾水，并稱其蒸鎦水重量，同樣記下蒸餾水重量及水溫。計算出容積及校正值，如果相對百分誤差大于±2%時，應進行調整。調整后，必須再進檢測，直至微量移液器能正確給出調整的容積。 （4）注意事項 1）吸取液體時一定要緩慢平穩地松開拇指，絕不允許突然松開，以防將溶液吸入過快而沖入取液器內腐蝕柱塞而造成漏氣。 2）加樣時，微量移液器吸頭只能以垂直方式浸入2~3mm，因為傾斜的方式將減少液體柱的高度，導致吸取液體過多。為確保樣本的穩定釋放，微量移液器吸頭應靠在試管壁上，液體順著管壁流出，避免出現液滴，液滴的形成可由于其表面張力的作用而阻止樣本的釋放。 3）當微量移液器中有溶液時，不得倒放，必須垂直放置，否則久后失準。 4）發現吸液時有氣泡，將液體排回原容器；檢查吸頭浸入液體是否太深；換個吸頭重新吸取樣本。 2. 721型分光光度計的使用光譜范圍在360~800nm，所有部件均在一主機內，操作方便，靈敏度髙。 （1）原理:以12V25W白灼鎢燈為光源，經透鏡聚光后射入單色光器內，經棱鏡色散反射到準直鏡，穿狹縫得到，波長范圍更窄的光波作為人射光進入比色皿，透出的光波被受光器光電管所接受，產生光電流，再經放大在微安表上反映出電流大小，并直接讀出光密度。 （2）使用方法 1）靈敏度選擇鈕放在“1”（如調不到“0”的選用較高檔）。 2）轉動波長旋鈕，選用所需波長。 3）接通電源，打開電源開關，將儀器預熱。 4）打開樣品池蓋（光門擋板自動遮住光路），轉動零點調節旋鈕，使電流指針恢復到透光度“0”。 5）將比色皿放人杯架中，使空白液對向光路，蓋好樣品池蓋，轉動“100%”，調準電表指針使之指向透光度100%位置上。 6）將標準液及測定液的比色杯依次推人光路，即可自電流計直接讀出其光密度值。使用完畢后，將開關放回“關”的位置，切斷電源，并將比色ML取出，用蒸餾水充分洗干凈。 （3）注意事項 1）分光光度計屬精密儀器，應精心愛護使用。防震、防潮、防腐蝕。 2）要保持比色皿的清潔干凈，保護光學面的透明度。 3）讀取光密度值的時間應盡量縮短，以防光電系統疲勞，如連續使用時，中間應適當使之避光休息。 4）比色皿不要放置在儀器面上，以免液體腐蝕儀器表面。 5）調“0”位及“100%”旋鈕要輕旋，旋到終點時指針仍未指到位，一定不能再用力旋，以免損壞電位器。 3.雙縮脲法測定蛋白質含量取試管3支，標明測定、標準和空白，然后按下表操作。 混勻，37℃水浴l0min，冷卻至室溫，在分光光度計波長540mn處，用空白管調零，比色測定，讀取標準管，測定管的光密度值。 【結果分析】 【注意事項】 （1）雙縮脲試劑要封閉貯存，防止吸收空氣中的二氧化碳。 （2）本法各種蛋白質的顯色程度基本相同，重復性好，幾乎不受溫度影響，**缺點是靈敏度較低。 （3）
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