目錄
前言
緒論 1
第1章 遺傳工程的分子生物學基礎 16
1.1 基因的概念和結構 16
1.2 DNA復制 18
1.2.1 DNA復制的特點及其調控 18
1.2.2 人工DNA復制——PCR 19
1.3 DNA轉錄及其調控 21
1.4 RNA的轉錄后加工及其調控 22
1.4.1 mRNA的特征 22
1.4.2 內含子的拼接?編輯和化學修飾 22
1.4.3 RNA干擾(RNAi) 23
1.5 蛋白表達及其調控 24
1.5.1 三聯體密碼子 25
1.5.2 蛋白質的加工和修飾 25
1.5.3 蛋白質的降解 26
1.6 限制性內切核酸酶 26
主要參考文獻 28
第2章 基因工程原理和實踐 29
2.1 重組DNA技術發展史上的重大事件 29
2.2 目的基因的分離 30
2.2.1 通過構建cDNA文庫和基因文庫分離目的基因 30
2.2.2 用PCR方法從基因組中擴增出目的基因 31
2.2.3 DNA的化學合成 31
2.3 基因重組 32
2.4 基因工程載體 32
2.4.1 質粒載體 33
2.4.2 噬菌體和病毒載體 34
2.4.3 YAC載體 34
2.5 植物轉化方法 34
2.5.1 農桿菌介導轉化法 35
2.5.2 基因槍介導轉化法 36
2.5.3 花粉管通道法 36
2.6 轉基因動物的制作方法 37
2.6.1 逆轉錄病毒載體感染早期發育的動物胚胎及MⅡ期的卵母細胞 37
2.6.2 原核期胚胎的顯微注射技術 37
2.6.3 精子載體技術 37
2.6.4 胚胎干細胞技術 37
2.6.5 P-C技術 38
2.6.6 體細胞核移植技術 38
2.6.7 人工染色體載體技術 38
2.6.8 脂質體載體技術 39
2.6.9 電脈沖技術 39
2.7 轉基因生物研發的一般過程 39
主要參考文獻 40
第3章 轉基因生物技術的發展 42
3.1 轉基因植物的發展 42
3.1.1 轉基因作物的發展現狀 42
3.1.2 轉基因林木的發展現狀 44
3.2 轉基因動物研究進展 46
3.2.1 動物轉基因技術的研究進展 47
3.2.2 轉基因動物的應用 48
3.2.3 中國轉基因動物研究進展 54
3.3 轉基因微生物研究進展 57
3.3.1 轉基因微生物在農業生產領域的應用 57
3.3.2 轉基因微生物在食品生產領域的應用 61
3.3.3 轉基因微生物在藥物生產領域的應用 61
3.3.4 轉基因微生物在其他領域的應用 61
3.4 基因工程疫苗 62
3.4.1 基因工程疫苗的利用 63
3.4.2 基因工程疫苗的研究進展 64
主要參考文獻 67
第4章 轉基因食品對健康的潛在風險 69
4.1 轉基因食品商業化生產現狀 69
4.1.1 美國轉基因食品的商業化現狀 69
4.1.2 歐盟轉基因食品的商業化現狀 72
4.1.3 中國轉基因食品的商業化現狀 73
4.2 DNA的人體暴露 73
4.2.1 食品中的DNA 73
4.2.2 消化系統中DNA的穩定性 74
4.2.3 人體細胞中重組DNA的水平轉移 75
4.3 轉基因食品對健康的潛在風險 76
4.3.1 轉基因食品健康風險的概念 76
4.3.2 與基因表達產物(非核酸物質)相關的健康影響 76
4.3.3 蛋白質可能的致敏性 77
4.3.4 食品關鍵成分相關的安全問題 79
4.3.5 轉基因食品中標記基因的生物安全性問題 80
4.4 轉基因食品風險評估的方案 80
4.4.1 消化道作為轉基因食品風險評估的**目標 80
4.4.2 關于轉基因作物和食品健康評估的建議方案 81
4.4.3 問題和結論 82
主要參考文獻 82
第5章 轉基因生物的生態風險 85
5.1 轉基因生物對生態環境的影響 85
5.1.1 轉基因生物的靶標效應 86
5.1.2 轉基因生物的非靶標效應 87
5.1.3 外源基因逃逸 88
5.1.4 外源基因在生態系統中的積累 88
5.1.5 轉基因生物入侵 89
5.2 水平基因流——重組DNA的生物安全 89
5.2.1 重組DNA在不同環境中的潛在影響 90
5.2.2 原核細胞中重組DNA水平基因流 91
5.3 垂直基因流——外源基因逃逸的理論基礎 92
5.3.1 基因流的概念 92
5.3.2 外源轉基因逃逸的對象 92
5.3.3 外源轉基因逃逸的途徑 93
5.3.4 花粉介導基因流的潛在影響 94
主要參考文獻 100
第6章 轉基因生物風險評價:方法和案例 103
6.1 轉基因生物風險評價的一般原則和方法 103
6.2 轉基因經濟作物的風險評價 104
6.2.1 轉基因棉的風險評價 104
6.2.2 轉基因大豆的風險評價 110
6.2.3 轉基因油菜的風險評價 111
6.3 轉基因糧食作物的風險評價 112
6.3.1 轉基因水稻的風險評價 112
6.3.2 轉基因玉米的風險評價 112
6.3.3 轉基因小麥的風險評價 114
6.4 轉基因林木的風險評價 115
主要參考文獻 117
附錄1:《卡塔赫納生物安全議定書》附錄Ⅲ 119
附錄2:農業部《轉基因植物安全評價指南(試行)》 121
第7章 轉基因生物風險管理 128
7.1 風險管理的定義?目標和要求 128
7.2 轉基因生物風險管理的理論基礎——科學不確定性 129
7.2.1 科學上的不確定性和復雜性 129
7.2.2 轉基因生物風險的不確定性和復雜性的來源 130
7.2.3 從技術和科學的不確定性上構建預防模型 131
7.3 轉基因生物風險管理的原則——預防原則 132
7.3.1 預防原則的概念 132
7.3.2 預防原則的實施對風險威脅的回應 133
7.3.3 預防原則的實施涉及科學上的不確定性 134
7.3.4 熟悉原則?實質等同與預防原則 135
7.3.5 積極措施的必要性 136
7.3.6 預防原則和證據負擔 136
7.3.7 預告原則和規范標準 137
7.4 轉基因生物管理實踐(以歐盟為例) 137
7.4.1 歐盟的環境釋放 138
7.4.2 歐盟的轉基因食品和飼料 139
7.4.3 歐盟的可追蹤性原則 140
7.4.4 歐盟轉基因生物的越境轉移 140
7.4.5 歐盟的共存原則 140
主要參考文獻 141
第8章 外源基因檢測和環境監測 143
8.1 外源基因檢測和環境監測的意義和必要性 143
8.2 外源基因檢測的方法 144
8.2.1 利用PCR檢測外源基因的優勢 144
8.2.2 -MO的PCR分析流程 145
8.2.3 應用PCR檢測樣本的-MO成分 146
8.2.4 確保可靠的PCR檢測結果的措施 150
8.2.5 驗證PCR結果的方法 151
8.3 -MO中蛋白質的免疫學分析 151
8.3.1 免疫檢測的基本原理 151
8.3.2 免疫檢測的局限性 152
8.4 轉基因微生物的檢測方法 153
8.4.1 平板菌落計數法 153
8.4.2 免疫熒光抗體法 153
8.4.3 核酸序列分析 154
8.4.4 DNA雜交技術 154
8.5 -MO檢測實驗的統一標準 154
8.5.1 標準操作程序 154
8.5.2 實驗室的執行評估 154
8.5.3 實驗室資格鑒定 154
8.5.4 -MO檢測方法的國際標準化 155
8.6 -MO的環境監測 155
8.6.1 怎么開始監測? 156
8.6.2 環境影響——需要監測什么? 156
8.6.3 人類和動物健康影響——需要監測什么? 156
8.6.4 在哪里監測-MO/LMO的影響? 157
8.6.5 歐盟和國際的監測健康及環境影響的現狀 158
8.6.6 建立以環境監測為基礎的生物安全框架 159
8.6.7 追蹤-MO環境釋放的其他工具 159
主要參考文獻 160
第9章 生物安全國際法:卡塔赫納生物安全議定書 163
9.1 《議定書》的產生背景 163
9.1.1 《卡塔赫納生物安全議定書》與《生物多樣性公約》的關系 163
9.1.2 《生物安全議定書》的起草過程 164
9.1.3 《生物安全議定書》的談判過程 164
9.1.4 《生物安全議定書》談判的爭論焦點 165
9.2 《生物安全議定書》體現的基本原則 167
9.2.1 預先防范原則 167
9.2.2 國際合作原則 167
9.2.3 無害利用原則 168
9.2.4 轉基因生物謹慎發展原則 168
9.3 《生物安全議定書》的基本內容 169
9.3.1 一般性條款 169
9.3.2 提前知情同意程序 170
9.3.3 風險評估 171
9.3.4 風險管理 171
9.3.5 處理?運輸?包裝和標志 172
9.3.6 能力建設與公眾參與 173
9.3.7 賠償責任與補救 174
9.4 《生物安全議定書》后續談判的進展 174
9.4.1 **次締約方會議(COP-MOP1) 174
9.4.2 第二次締約方會議(COP-MOP2) 176
9.4.3 第三次締約方會議(COP-MOP3) 177
9.4.4 第四次締約方會議(COP-MOP4) 178
9.4.5 對各屆締約方會議進展的綜合評論 180
主要參考文獻 182
第10章 部分國家的生物安全法規與制度 183
10.1 歐盟的生物安全法規與制度 183
10.1.1 歐盟生物安全法的理念基礎:風險預防原則 183
10.1.2 歐盟的生物安全法管理體制 184
10.1.3 歐盟的重要生物安全法規 184
10.2 美國的生物安全法規與制度 188
10.2.1 美國生物安全法的理念基礎:實質等同原則 189
10.2.2 美國的重要生物安全法規 189
10.3 日本的生物安全法規與制度 192
10.3.1 關于轉基因生物工業化安全管理的重要法規 192
10.3.2 關于轉基因生物實驗室研究安全管理的重要法規 192
10.3.3 關于轉基因農業和食品安全管理的重要法規 193
10.3.4 關于規制轉基因生物以保護生物多樣性的重要法規 194
10.3.5 其他有關生物安全管理的法規 196
10.4 印度的生物安全法規與制度 196
10.4.1 印度的生物安全管理體制 196
10.4.2 印度生物安全立法的體系和主要內容 197
10.5 巴西的生物安全法規與制度 199
10.5.1 巴西