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百合抗病細胞工程育種與實踐 版權信息
- ISBN：9787030615121
- 條形碼：9787030615121 ; 978-7-03-061512-1
- 裝幀：一般輕型紙
- 冊數(shù)：暫無
- 重量：暫無
- 所屬分類：>
百合抗病細胞工程育種與實踐 內容簡介
由尖孢鐮刀菌百合專化型(Fusarium oxysporum f. sp. lilii)引起的百合枯萎病是百合切花種植和種球繁育過程中經(jīng)常發(fā)生的主要病害。目前培育并合理利用抗尖孢鐮刀菌百合枯萎病的新優(yōu)品種是防治該病經(jīng)濟有效的方法。百合由于育種周期長，抗病品種選育進展遲緩，利用細胞無性系變異和將病原菌毒素加入培養(yǎng)基中篩選抗病性種質是選育抗病品種的有效手段，但在花卉上的應用較少，而對其抗病機制的深入研究也鮮見報道。《百合抗病細胞工程育種與實踐》以篩選抗病無性系為例，主要是通過培養(yǎng)百合細胞無性系并進行尖孢鐮刀菌百合專化型毒素粗提液加壓篩選獲得東方百合品種‘卡薩布蘭卡’(‘Casa Blanca’)的抗病無性系，同時以正常生長的‘Casa Blanca’組培苗即感病無性系為對照，從組織細胞學水平、生理生化水平及分子水平上探討其抗病機制。
百合抗病細胞工程育種與實踐 目錄
目錄
前言
第1章 緒論 1
1.1 百合枯萎病 1
1.1.1 癥狀和特點 1
1.1.2 病原 2
1.1.3 發(fā)病規(guī)律 5
1.1.4 綜合防治 5
1.2 體細胞無性系誘變篩選抗病種質的相關進展 8
1.2.1 體細胞無性系變異 8
1.2.2 離體篩選的原理、程序和選擇方法 8
1.2.3 離體誘變育種 9
1.3 百合組織培養(yǎng)研究進展 14
1.4 植物細胞懸浮培養(yǎng)技術研究進展 15
1.4.1 愈傷組織的誘導 15
1.4.2 影響懸浮細胞系建立的因子 16
1.5 尖孢鐮刀菌抗性機制的研究進展 17
1.5.1 尖孢鐮刀菌抗性機制的細胞學研究 17
1.5.2 尖孢鐮刀菌抗性機制的生理學研究 18
1.5.3 尖孢鐮刀菌抗性機制的分子基礎研究 19
1.6 尖孢鐮刀菌毒素作用機制的研究 22
第2章 百合懸浮細胞系的建立 25
2.1 懸浮細胞系的初始建立 25
2.2 繼代次數(shù)與細胞形態(tài)之間的關系 26
2.3 關于百合細胞懸浮培養(yǎng)的討論 26
第3章 百合抗尖孢鐮刀菌細胞突變系的篩選 28
3.1 尖孢鐮刀菌百合專化型毒素粗提液的活性和篩選壓的確定 29
3.1.1 尖孢鐮刀菌百合專化型毒素粗提液的活性 29
3.1.2 篩選壓的確定 31
3.2 百合抗尖孢鐮刀菌枯萎病無性系的篩選 31
3.3 百合抗尖孢鐮刀菌枯萎病無性系的抗病性鑒定 32
3.4 關于篩選抗病無性系的討論 34
3.4.1 真菌毒素及其篩選技術 34
3.4.2 突變體的鑒定技術 34
第4章 百合抗尖孢鐮刀菌細胞突變系的組織細胞學抗性 35
4.1 抗病無性系和感病無性系的根部結構 35
4.2 抗病無性系和感病無性系在接種以后根部的細胞超微結構變化 36
4.3 關于抗病無性系組織抗性的討論 40
第5章 百合抗尖孢鐮刀菌細胞突變系的生化抗性 41
5.1 抗病無性系和感病無性系的POD活性變化 42
5.2 抗病無性系和感病無性系的PAL活性變化 42
5.3 抗病無性系和感病無性系的PPO活性變化 43
5.4 抗病無性系和感病無性系的β-1，3-葡聚糖酶活性變化 44
5.5 抗病無性系和感病無性系的幾丁質酶活性變化 44
5.6 關于抗病無性系生理抗性的討論 45
第6章 百合抗尖孢鐮刀菌細胞突變系的轉錄組分析 46
6.1 樣品總RNA提取質量分析 46
6.2 測序結果統(tǒng)計分析 47
6.3 組裝結果統(tǒng)計和評估 50
6.3.1 組裝結果統(tǒng)計 50
6.3.2 組裝結果評估 50
6.4 Unigene的功能注釋 52
6.4.1 ORF預測 52
6.4.2 SSR分析 52
6.4.3 差異表達基因聚類 52
6.5 SSR分析 57
6.6 百合抗病無性系和感病無性系及不同接種時間點差異基因分析 57
6.6.1 百合抗病無性系和感病無性系兩分組差異基因篩選 57
6.6.2 差異基因功能注釋及分類 59
6.7 Q-PCR 驗證 64
6.8 關于轉錄組測序技術旳應用 65
6.9 關于Unigene的生物信息學的注釋 67
6.10 抗病性相關代謝路徑及差異基因分析 67
6.10.1 寄主植物激素信號轉導途徑 67
6.10.2 寄主植物與病原菌互作 68
6.10.3 細胞壁防衛(wèi)抗病途徑 68
第7章 百合抗尖孢鐮刀菌細胞突變系的蛋白質組分析 70
7.1 蛋白質雙向電泳技術的建立 71
7.1.1 百合總蛋白質的提取方法 71
7.1.2 蛋白質定量 71
7.1.3 蛋白質質量檢測 72
7.1.4 雙向電泳 72
7.1.5 染色及圖像采集分析 72
7.1.6 百合總蛋白質提取方法的比較 73
7.1.7 百合總蛋白質雙向電泳上樣量的優(yōu)化 74
7.1.8 百合總蛋白質除鹽時間的優(yōu)化 75
7.2 百合雙向電泳差異蛋白質組分析 76
7.2.1 百合葉片總蛋白質的提取、定量 76
7.2.2 差異蛋白點處理及質譜分析 76
7.2.3 數(shù)據(jù)庫檢索 76
7.2.4 百合抗病無性系和感病無性系的雙向電泳圖譜分析 77
7.2.5 百合抗病無性系和感病無性系的蛋白質功能鑒定及豐度變化分析 83
7.3 iTRAQ蛋白質組分析 83
7.3.1 蛋白質的提取、濃度測定及檢測 83
7.3.2 iTRAQ標記分析 84
7.3.3 差異蛋白分析 86
7.3.4 GO 功能分類富集分析 87
7.3.5 代謝途徑分析 90
7.4 關于百合蛋白質提取及雙向電泳技術優(yōu)化的問題 94
7.5 百合蛋白質雙向電泳差異蛋白的抗病性 95
7.5.1 光合作用和能量代謝相關蛋白參與百合的防衛(wèi)反應 95
7.5.2 防衛(wèi)反應相關蛋白是抗病的關鍵因素 96
7.5.3 可能與百合抗病無性系抗病性相關的其他蛋白質 96
7.6 關于iTRAQ蛋白質組分析的問題 96
參考文獻 98
附表 116
前言
第1章 緒論 1
1.1 百合枯萎病 1
1.1.1 癥狀和特點 1
1.1.2 病原 2
1.1.3 發(fā)病規(guī)律 5
1.1.4 綜合防治 5
1.2 體細胞無性系誘變篩選抗病種質的相關進展 8
1.2.1 體細胞無性系變異 8
1.2.2 離體篩選的原理、程序和選擇方法 8
1.2.3 離體誘變育種 9
1.3 百合組織培養(yǎng)研究進展 14
1.4 植物細胞懸浮培養(yǎng)技術研究進展 15
1.4.1 愈傷組織的誘導 15
1.4.2 影響懸浮細胞系建立的因子 16
1.5 尖孢鐮刀菌抗性機制的研究進展 17
1.5.1 尖孢鐮刀菌抗性機制的細胞學研究 17
1.5.2 尖孢鐮刀菌抗性機制的生理學研究 18
1.5.3 尖孢鐮刀菌抗性機制的分子基礎研究 19
1.6 尖孢鐮刀菌毒素作用機制的研究 22
第2章 百合懸浮細胞系的建立 25
2.1 懸浮細胞系的初始建立 25
2.2 繼代次數(shù)與細胞形態(tài)之間的關系 26
2.3 關于百合細胞懸浮培養(yǎng)的討論 26
第3章 百合抗尖孢鐮刀菌細胞突變系的篩選 28
3.1 尖孢鐮刀菌百合專化型毒素粗提液的活性和篩選壓的確定 29
3.1.1 尖孢鐮刀菌百合專化型毒素粗提液的活性 29
3.1.2 篩選壓的確定 31
3.2 百合抗尖孢鐮刀菌枯萎病無性系的篩選 31
3.3 百合抗尖孢鐮刀菌枯萎病無性系的抗病性鑒定 32
3.4 關于篩選抗病無性系的討論 34
3.4.1 真菌毒素及其篩選技術 34
3.4.2 突變體的鑒定技術 34
第4章 百合抗尖孢鐮刀菌細胞突變系的組織細胞學抗性 35
4.1 抗病無性系和感病無性系的根部結構 35
4.2 抗病無性系和感病無性系在接種以后根部的細胞超微結構變化 36
4.3 關于抗病無性系組織抗性的討論 40
第5章 百合抗尖孢鐮刀菌細胞突變系的生化抗性 41
5.1 抗病無性系和感病無性系的POD活性變化 42
5.2 抗病無性系和感病無性系的PAL活性變化 42
5.3 抗病無性系和感病無性系的PPO活性變化 43
5.4 抗病無性系和感病無性系的β-1，3-葡聚糖酶活性變化 44
5.5 抗病無性系和感病無性系的幾丁質酶活性變化 44
5.6 關于抗病無性系生理抗性的討論 45
第6章 百合抗尖孢鐮刀菌細胞突變系的轉錄組分析 46
6.1 樣品總RNA提取質量分析 46
6.2 測序結果統(tǒng)計分析 47
6.3 組裝結果統(tǒng)計和評估 50
6.3.1 組裝結果統(tǒng)計 50
6.3.2 組裝結果評估 50
6.4 Unigene的功能注釋 52
6.4.1 ORF預測 52
6.4.2 SSR分析 52
6.4.3 差異表達基因聚類 52
6.5 SSR分析 57
6.6 百合抗病無性系和感病無性系及不同接種時間點差異基因分析 57
6.6.1 百合抗病無性系和感病無性系兩分組差異基因篩選 57
6.6.2 差異基因功能注釋及分類 59
6.7 Q-PCR 驗證 64
6.8 關于轉錄組測序技術旳應用 65
6.9 關于Unigene的生物信息學的注釋 67
6.10 抗病性相關代謝路徑及差異基因分析 67
6.10.1 寄主植物激素信號轉導途徑 67
6.10.2 寄主植物與病原菌互作 68
6.10.3 細胞壁防衛(wèi)抗病途徑 68
第7章 百合抗尖孢鐮刀菌細胞突變系的蛋白質組分析 70
7.1 蛋白質雙向電泳技術的建立 71
7.1.1 百合總蛋白質的提取方法 71
7.1.2 蛋白質定量 71
7.1.3 蛋白質質量檢測 72
7.1.4 雙向電泳 72
7.1.5 染色及圖像采集分析 72
7.1.6 百合總蛋白質提取方法的比較 73
7.1.7 百合總蛋白質雙向電泳上樣量的優(yōu)化 74
7.1.8 百合總蛋白質除鹽時間的優(yōu)化 75
7.2 百合雙向電泳差異蛋白質組分析 76
7.2.1 百合葉片總蛋白質的提取、定量 76
7.2.2 差異蛋白點處理及質譜分析 76
7.2.3 數(shù)據(jù)庫檢索 76
7.2.4 百合抗病無性系和感病無性系的雙向電泳圖譜分析 77
7.2.5 百合抗病無性系和感病無性系的蛋白質功能鑒定及豐度變化分析 83
7.3 iTRAQ蛋白質組分析 83
7.3.1 蛋白質的提取、濃度測定及檢測 83
7.3.2 iTRAQ標記分析 84
7.3.3 差異蛋白分析 86
7.3.4 GO 功能分類富集分析 87
7.3.5 代謝途徑分析 90
7.4 關于百合蛋白質提取及雙向電泳技術優(yōu)化的問題 94
7.5 百合蛋白質雙向電泳差異蛋白的抗病性 95
7.5.1 光合作用和能量代謝相關蛋白參與百合的防衛(wèi)反應 95
7.5.2 防衛(wèi)反應相關蛋白是抗病的關鍵因素 96
7.5.3 可能與百合抗病無性系抗病性相關的其他蛋白質 96
7.6 關于iTRAQ蛋白質組分析的問題 96
參考文獻 98
附表 116
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