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形態學實驗技術 版權信息
- ISBN:9787811160758
- 條形碼:9787811160758 ; 978-7-81116-075-8
- 裝幀:暫無
- 冊數:暫無
- 重量:暫無
- 所屬分類:>>
形態學實驗技術 內容簡介
有位前輩曾說過:一名合格的實驗技術人員應具備聽、說、讀、寫、思五項能力。聽,聽他人的實驗思路、實踐經驗,以充實自身的實驗設計;說,多與他人交流,在交流中捕捉靈感,豐滿與糾正實驗過程;讀,博覽全書,閱讀文獻著作,積累素材,優選實驗方案;寫,手要勤,隨時記錄實驗感受與疑惑,尋找解決疑惑的途徑;思,則*為重要,實驗中存在一些不確定性因素,勤于思考,設計嚴謹周密的實驗技術路線,隨時調整實驗流程與操作。
在當今生物學和醫學領域中,由于新技術、新方法的層出不窮、日益更新,以及各個專業間的相互滲透與融合,這就要求實驗技術人員不僅要熟知本專業的實驗技術與方法,同時還應了解與熟悉其他與本專業相關的實驗技術內容。實驗技術的實質是實踐經驗積累與沉淀的過程,多次循環往復,不單單是實驗技術熟練的過程,更是熟能生巧、巧中生新的過程。如Masson三色染色(Masson P,1929)經歷了許多實驗者不斷摸索、改良與優化,以及各自對染色的理解與需求,使其在獲得準確的染色結果前提下得到了技術上的提高,這就是一些傳統技術方法一直能沿用至今的緣故。新技術、新方法應用的同時,傳統實驗技術也不應被忽略、放棄。為了能使更多的實驗人員全面地了解形態學石蠟切片技術的相關內容,為了給以形態學改變為依托的研究課題提供實驗原理、實驗操作及注意事項等相應的信息,同時也是為了對過去所積累的實踐經驗進行梳理總結,十位不同院校的編者共同努力完成了本書的編寫。
本書以實用性、穩定性、可操作性為編寫宗旨。實用性是從使用者的角度,依據編者的實踐經驗總結和國內外實驗技術的發展,去選擇與編排實驗技術方法與流程等,通過石蠟切片、蘇木精一伊紅染色、特殊染色以及免疫組織化學和原位雜交技術的介紹,使讀者對石蠟切片技術有一個全面的了解,也為相關形態學技術的學習奠定基礎。穩定性是指所選用的實驗技術結果的穩定性,對于初學者而言,實驗操作及實驗結果呈現的可重復性尤為重要。而可操作性則是指從初學者的實際出發,對每項實驗技術力求介紹其原理、具體實驗操作及實驗注意事項等,通俗易懂且操作性強,以期起到實驗指南的作用。
形態學實驗技術 目錄
第1章 形態學制片種類
一、非切片制作方法
二、組織切片制作方法
第2章 組織學石蠟切片制作技術
第1節 標本取材
一、實驗動物的處死方法
二、不同組織器官的取材方法
三、取材注意事項
附:大鼠胸、腹腔臟器的取材方法
第2節 標本固定
一、固定的目的和作用
二、固定的方式
三、影響固定作用的因素
四、固定后的標本修整
五、固定后的標本沖洗
六、固定容器
七、常用固定劑的性質及應用
第3節 標本處理過程:脫水、透明、浸蠟、包埋
一、脫水
二、透明
三、浸蠟
四、包埋
第4節 石蠟切片
一、石蠟切片機與切片刀
二、石蠟切片技術
第5節 染色與染料
一、染色與生物染料
二、染色作用的原理
三、染色方法
四、媒染劑和促染劑
五、染色形式
第6節 蘇木精-伊紅染色
一、蘇木精
二、伊紅
三、石蠟切片蘇木精-伊紅染色
第7節 封固
一、封固的目的
二、封固劑種類
三、封固劑的折光率
四、常規石蠟切片封固方法
第3章 特殊染色技術
第1節 膠原纖維染色
一、形態結構與特點
二、膠原纖維染色
三、磷鉬酸和(或)磷鎢酸在染色中的作用
四、影響結締組織三色染色的因素
附:苦味酸一天狼猩紅染色顯示膠原纖維
第2節 彈性纖維染色
一、形態結構與特點
二、彈性纖維染色
第3節 網狀纖維染色
一、形態結構與特點
二、網狀纖維銨銀技術的基本步驟與作用
三、常用的銨銀方法
四、網狀纖維銨銀方法的基本要求
第4節 肥大細胞染色
一、形態結構與特點
二、肥大細胞染色
……
第4章 免疫組織(細胞)化學技術
第5章 原位核酸分子雜交
第6章 形態學技術實驗指導
第7章 附錄
形態學實驗技術 節選
第1章 形態學制片種類
組織學標本的制作有很多方法,但總體上可以粗略歸納為兩大類:非切片制作方法和切片制作方法。
一、非切片制作方法
非切片制作方法,顧名思義就是無需借助于切片機(不需要切片操作)即可制成組織標本的方法。非切片法制作組織標本的種類很多,大致可包括:組織分離標本、組織活體標本、細胞涂片標本、磨片標本、整體封存標本、組織鋪片標本6類。依據實驗目的和所觀察的實驗對象的要求可適當地選擇不同的標本制作方法。
非切片制作方法的優點:標本制作方法簡單,組織結構基本不被破壞,能保持原有的組織或細胞的形態結構,*為重要的是標本內的細胞是完整的。制作過程所產生的人工假象較少;使用的藥物、儀器較少;在較短的時間內即可觀察到組織或細胞的形態。但是,非切片制作方法應用的范圍局限,有些組織標本不能長期保存、不能觀察到細胞內部的結構是其不足之處。
(一)組織分離標本
組織分離標本主要是觀察機體的單個細胞形態結構,如平滑肌細胞、脊髓前角神經細胞、呼吸道或消化道的上皮細胞等。目前,分離標本制作的方法已不同于以前的應用范圍,而是較為廣泛地應用在許多專業,尤其是細胞培養方面的細胞形態學觀察。
傳統的組織分離標本制作方法:將一小塊新鮮組織浸泡在一定濃度的某種化學試劑(氫氧化鈉)中,通過化學作用(腐蝕作用),溶解組織內的結締組織和細胞間質,再經過振蕩、吹打和離心等程序,*后構成組織的細胞成為一個個分離的單細胞狀態。
目前制作分離標本的方法:新鮮組織經過消化酶(胰蛋白酶等)的消化作用將被分離成單個細胞,再經密度梯度離心等步驟,可獲得較為純化的單個細胞懸液。
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