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毒理學(xué)綜合實(shí)驗(yàn)教程 版權(quán)信息
- ISBN：9787030485458
- 條形碼：9787030485458 ; 978-7-03-048545-8
- 裝幀：一般膠版紙
- 冊(cè)數(shù)：暫無
- 重量：暫無
- 所屬分類：>>
毒理學(xué)綜合實(shí)驗(yàn)教程 內(nèi)容簡介
本書介紹了毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)、一般毒性研究及其技術(shù)、遺傳毒性研究及其技術(shù)、致癌作用研究及其技術(shù)、生殖發(fā)育毒性研究及其技術(shù)以及7個(gè)靶器官或系統(tǒng)(肝臟、腎臟、呼吸、神經(jīng)、免疫、血液和皮膚)的毒理學(xué)研究及技術(shù)。
毒理學(xué)綜合實(shí)驗(yàn)教程 目錄
目錄
實(shí)驗(yàn)一 毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)知識(shí)與綜合技能 1
一、案例與問題 1
二、毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)概述 1
三、毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)規(guī)范與職業(yè)道德 3
四、毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)要求 4
五、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理與實(shí)驗(yàn)者自身防護(hù) 6
六、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)流程與基本操作技術(shù) 7
七、思考題 13
實(shí)驗(yàn)二 毒物代謝動(dòng)力學(xué)研究與實(shí)驗(yàn)技術(shù) 14
一、教學(xué)目的與意義 14
二、背景資料 14
三、案例與問題 14
四、課題設(shè)計(jì)與實(shí)驗(yàn)指導(dǎo) 15
課題名稱：對(duì)硫磷與甲基對(duì)硫磷代謝動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn) 15
五、毒物代謝動(dòng)力學(xué)試驗(yàn)主要方法與技術(shù) 21
【題目】甲基對(duì)硫磷的代謝轉(zhuǎn)化試驗(yàn) 21
六、思考題 24
實(shí)驗(yàn)三 一般毒性研究與實(shí)驗(yàn)技術(shù) 25
一、教學(xué)目的與意義 25
二、背景資料 25
三、案例與問題 26
四、課題設(shè)計(jì)與實(shí)驗(yàn)指導(dǎo) 26
課題名稱：氯胺嘧草醚的一般毒性試驗(yàn)與評(píng)價(jià) 26
五、一般毒性試驗(yàn)主要方法與技術(shù) 28
（一）急性經(jīng)口毒性試驗(yàn) 28
（二）急性吸入毒性試驗(yàn) 33
（三）急性經(jīng)皮毒性試驗(yàn) 34
（四）亞慢性毒性實(shí)驗(yàn) 35
（五）慢性毒性試驗(yàn) 38
六、思考題 40
實(shí)驗(yàn)四 遺傳毒性研究與實(shí)驗(yàn)技術(shù) 41
一、教學(xué)目的與意義 41
二、背景資料 41
三、案例與問題 42
四、課題設(shè)計(jì)與實(shí)驗(yàn)指導(dǎo) 42
課題名稱：苯并（a）芘的遺傳毒性測試與評(píng)價(jià) 42
五、遺傳毒性試驗(yàn)主要方法與技術(shù)43
（一）鼠傷寒沙門菌營養(yǎng)缺陷型回復(fù)突變?cè)囼?yàn) 43
（二）哺乳動(dòng)物細(xì)胞基因突變?cè)囼?yàn) 47
實(shí)驗(yàn)1小鼠淋巴瘤細(xì)胞L5178YTK+基因突變?cè)囼?yàn) 48
實(shí)驗(yàn)2中國倉鼠肺V79（CHO）/hGPRT基因突變?cè)囼?yàn) 49
（三）小鼠骨髓細(xì)胞微核試驗(yàn) 51
（四）染色體畸變分析 52
實(shí)驗(yàn)1 體外哺乳動(dòng)物細(xì)胞染色體畸變?cè)囼?yàn) 53
實(shí)驗(yàn)2 動(dòng)物骨髓細(xì)胞染色體畸變?cè)囼?yàn) 55
（五）單細(xì)胞凝膠電泳試驗(yàn) 56
六、思考題 58
實(shí)驗(yàn)五 表觀遺傳毒性研究與實(shí)驗(yàn)技術(shù) 59
一、教學(xué)目的與意義 59
二、背景資料 59
三、案例與問題 59
四、課題設(shè)計(jì)與實(shí)驗(yàn)指導(dǎo) 60
課題名稱：某環(huán)境有害因素與表觀遺傳修飾改變的關(guān)聯(lián)性研究 60
五、表觀遺傳毒性實(shí)驗(yàn)主要方法與技術(shù) 62
（一）DNA甲基化檢測的主要方法和技術(shù) 62
實(shí)驗(yàn)1 亞硫酸氫鹽修飾結(jié)合甲基化特異性PCR 62
實(shí)驗(yàn)2 亞硫酸氫鹽修飾后測序 64
（二）組蛋白修飾檢測的主要方法和技術(shù) 65
實(shí)驗(yàn)1 組蛋白特定位點(diǎn)修飾水平的檢測——蛋白質(zhì)印跡法 65
實(shí)驗(yàn)2 組蛋白特定位點(diǎn)在基因富集水平的檢測——染色質(zhì)免疫共沉淀法 67
（三）microRNA檢測的主要方法和技術(shù) 69
實(shí)驗(yàn)1 實(shí)時(shí)熒光定量PCR法檢測microRNA表達(dá) 69
實(shí)驗(yàn)2 雙熒光素酶報(bào)告系統(tǒng)驗(yàn)證microRNA靶基因 71
六、思考題 72
實(shí)驗(yàn)六 致癌作用研究與實(shí)驗(yàn)技術(shù) 73
一、教學(xué)目的與意義 73
二、背景資料 73
三、案例與問題 74
四、課題設(shè)計(jì)與實(shí)驗(yàn)指導(dǎo) 74
課題名稱：NNK致癌作用測試及評(píng)價(jià) 74
五、致癌作用實(shí)驗(yàn)主要方法與技術(shù) 76
（一）細(xì)胞體外惡性轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn) 76
（二）哺乳動(dòng)物長期致癌實(shí)驗(yàn) 81
（三）其他致癌實(shí)驗(yàn) 84
六、思考題 85
實(shí)驗(yàn)七 生殖發(fā)育毒性研究與實(shí)驗(yàn)技術(shù) 86
一、教學(xué)目的與意義 86
二、背景資料 86
三、案例與問題 86
四、課題設(shè)計(jì)與實(shí)驗(yàn)指導(dǎo) 87
課題名稱：鎘及其化合物的生殖發(fā)育毒性評(píng)價(jià) 87
五、生殖發(fā)育毒性試驗(yàn)主要方法與技術(shù) 89
（一）生育力和早期胚體發(fā)育毒性試驗(yàn) 89
（二）致畸試驗(yàn) 90
（三）圍生期發(fā)育毒性試驗(yàn) 93
（四）一代（或二代）生殖毒性試驗(yàn) 94
（五）精子質(zhì)量分析 96
（六）性激素水平的測定 97
（七）外源化學(xué)物對(duì)大鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞的損傷模型 98
（八）外源化學(xué)物對(duì)大鼠卵巢顆粒細(xì)胞的損傷模型 100
六、思考題 101
實(shí)驗(yàn)八 納米材料損害作用研究與實(shí)驗(yàn)技術(shù) 102
一、教學(xué)目的與意義 102
二、背景資料 102
三、案例與問題 103
四、課題設(shè)計(jì)與實(shí)驗(yàn)指導(dǎo) 103
課題名稱：納米二氧化鈦的毒性作用評(píng)價(jià) 103
五、納米材料損害作用試驗(yàn)主要方法與技術(shù) 105
（一）納米材料的前處理方法 105
（二）納米材料表面特征觀察 107
（三）納米材料對(duì)細(xì)胞活力的影響 108
（四）納米材料急性經(jīng)口毒性實(shí)驗(yàn) 109
六、思考題 111
實(shí)驗(yàn)九 電離輻射損害作用研究與實(shí)驗(yàn)技術(shù) 112
一、教學(xué)目的與意義 112
二、背景資料 112
三、案例與問題 112
四、課題設(shè)計(jì)與實(shí)驗(yàn)指導(dǎo) 112
課題名稱：電離輻射生物損傷效應(yīng)特征及常用檢測方法 112
五、電離輻射損害作用試驗(yàn)主要方法與技術(shù) 113
（一）核素溶液配制 113
（二）鈾礦塵對(duì)細(xì)胞增殖的影響 115
（三）鈾礦塵致支氣管上皮細(xì)胞損傷的活性氧檢測 116
（四）電離輻射致DNA雙鏈損傷的γ-H2AX含量變化檢測 117
六、思考題 119
實(shí)驗(yàn)十 呼吸系統(tǒng)毒性研究與實(shí)驗(yàn)技術(shù) 120
一、教學(xué)目的與意義 120
二、背景資料 120
三、案例與問題 121
四、課題設(shè)計(jì)與實(shí)驗(yàn)指導(dǎo) 121
課題名稱：PM2.5急性肺毒性作用研究 121
五、呼吸系統(tǒng)毒性試驗(yàn)主要方法與技術(shù) 123
（一）潮氣量和氣流流速測定 123
（二）胸內(nèi)壓測定 124
（三）呼吸道液分泌功能測定——小鼠酚紅排泄法 124
（四）支氣管肺泡灌洗液（BALF）分析 125
（五）大鼠氣道黏液中肺表面活性物質(zhì)的測定 128
（六）離體試驗(yàn)法 128
實(shí)驗(yàn)1 離體肺灌流與分析 128
實(shí)驗(yàn)2 離體氣管片試驗(yàn)法 129
實(shí)驗(yàn)3 乳鼠肺細(xì)胞原代培養(yǎng)與上皮細(xì)胞純化130
實(shí)驗(yàn)4 體外培養(yǎng)的肺巨噬細(xì)胞中乳酸脫氫酶（LDH）活性測定 131
六、思考題 133
實(shí)驗(yàn)十一 肝臟毒性研究與實(shí)驗(yàn)技術(shù) 134
一、教學(xué)目的與意義 134
二、背景資料 134
三、案例與問題 134
四、課題設(shè)計(jì)與實(shí)驗(yàn)指導(dǎo) 135
課題名稱：評(píng)價(jià)未知化學(xué)物肝損害及探討其毒性作用機(jī)制 135
五、肝臟毒性試驗(yàn)主要方法與技術(shù) 136
（一）肝損傷動(dòng)物模型建立 136
實(shí)驗(yàn)1 急性化學(xué)性肝損傷動(dòng)物模型 136
實(shí)驗(yàn)2 肝纖維化動(dòng)物模型 137
（二）肝臟亞細(xì)胞組分的制備 138
實(shí)驗(yàn)1 肝臟微粒體的制備 138
實(shí)驗(yàn)2 肝臟線粒體的制備 139
（三）肝損害體內(nèi)評(píng)價(jià)技術(shù) 139
實(shí)驗(yàn)1 肝微粒體細(xì)胞色素P450含量的測定 139
實(shí)驗(yàn)2 丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）活性測定 140
實(shí)驗(yàn)3 天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）活性測定 141
實(shí)驗(yàn)4 堿性磷酸酶（ALP）活性測定 142
實(shí)驗(yàn)5 肝臟排泄功能測定 143
實(shí)驗(yàn)6 肝臟分泌功能測定 144
實(shí)驗(yàn)7 肝纖維化測定 145
（四）肝損害體外評(píng)價(jià)方法 146
實(shí)驗(yàn)1 離體肝臟灌流與分析 146
實(shí)驗(yàn)2 肝細(xì)胞、Kupffer 和Ito細(xì)胞的分離與培養(yǎng) 148
實(shí)驗(yàn)3 肝細(xì)胞膜流動(dòng)性檢測 150
實(shí)驗(yàn)4 肝細(xì)胞線粒體膜通透性檢測 151
實(shí)驗(yàn)5 肝細(xì)胞線粒體膜電位檢測 152
實(shí)驗(yàn)6 肝細(xì)胞線粒體呼吸功能檢測 153
實(shí)驗(yàn)7 肝細(xì)胞線粒體能量代謝功能檢測 155
六、思考題 156
實(shí)驗(yàn)十二 腎臟毒性研究與實(shí)驗(yàn)技術(shù) 157
一、教學(xué)目的與意義 157
二、背景資料 157
三、案例與問題 158
（一）案例一 158
（二）案例二 158
四、課題設(shè)計(jì)與實(shí)驗(yàn)指導(dǎo) 158
課題名稱一：中藥關(guān)木通引起大鼠腎臟毒性作用探討 158
課題名稱二：綜合評(píng)價(jià)百草枯急性中毒引起的腎臟毒性作用 159
五、腎臟毒性試驗(yàn)主要方法與技術(shù) 160
（一）尿液的一般生化指標(biāo)測定 160
（二）腎臟血流動(dòng)力學(xué)和血流量分析 161
（三）腎小球?yàn)V過率測定 161
（四）血肌酐﹑尿素和尿酸濃度測定 162
（五）腎濃縮稀釋試驗(yàn) 163
（六）形態(tài)學(xué)和酶組織化學(xué)檢查 163
（七）腎臟微灌注及微穿刺技術(shù) 164
（八）腎皮質(zhì)薄片培養(yǎng)及腎膜囊泡的分離與應(yīng)用 165
六、思考題 166
實(shí)驗(yàn)十三 神經(jīng)系統(tǒng)毒性研究與實(shí)驗(yàn)技術(shù) 167
一、教學(xué)目的與意義 167
二、背景資料 167
三、案例與問題 168
（一）案例一 168
（二）案例二 168
（三）案例三 168
四、課題設(shè)計(jì)與實(shí)驗(yàn)指導(dǎo) 168
課題名稱一：評(píng)價(jià)MPTP對(duì)小鼠大腦多巴胺能神經(jīng)元的損傷 168
課題名稱二：綜合評(píng)價(jià)有機(jī)磷化合物的遲發(fā)性神經(jīng)毒性 169
課題名稱三：正己烷神經(jīng)毒性及機(jī)制探討 170
五、神經(jīng)系統(tǒng)毒性試驗(yàn)主要方法與技術(shù) 171
（一）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物神經(jīng)行為學(xué) 171
實(shí)驗(yàn)1 自主活動(dòng)度檢測（曠場試驗(yàn)） 171
實(shí)驗(yàn)2 Morris水迷宮實(shí)驗(yàn) 172
實(shí)驗(yàn)3 轉(zhuǎn)棒試驗(yàn)（滾軸試驗(yàn)） 173
實(shí)驗(yàn)4 后肢撐力實(shí)驗(yàn) 173
實(shí)驗(yàn)5 抓力測定 174
實(shí)驗(yàn)6 感覺神經(jīng)功能 174
方法1.鼠尾痛覺測定 174
方法2.智能熱板儀法 175
（二）神經(jīng)病理形態(tài)學(xué)方法 175
實(shí)驗(yàn)1 神經(jīng)細(xì)胞尼氏體染色 175
實(shí)驗(yàn)2 免疫組化檢測MPTP誘導(dǎo)的小鼠大腦多巴胺能神經(jīng)元損傷（SP法） 176
（三）周圍神經(jīng)傳導(dǎo)速度測定 178
（四）HPLC熒光法測定動(dòng)物大腦興奮性神經(jīng)遞質(zhì) 178
（五）大鼠海馬組織突觸膜谷氨酸受體的放射配體結(jié)合分析 179
（六）神經(jīng)元體外試驗(yàn)體系 181
（七）有機(jī)磷農(nóng)藥的遲發(fā)性神經(jīng)毒性評(píng)價(jià) 181
六、思考題 182
實(shí)驗(yàn)十四 免疫毒性研究與實(shí)驗(yàn)技術(shù) 183
一、教學(xué)目的與意義 183
二、背景資料 183
三、案例與問題 184
四、課題設(shè)計(jì)與實(shí)驗(yàn)指導(dǎo) 184
課題名稱：阿特拉津的免疫毒性檢測與評(píng)價(jià) 184
五、免疫毒性試驗(yàn)主要方法與技術(shù) 185
（一）體液免疫檢測 185
實(shí)驗(yàn)1 溶血空斑實(shí)驗(yàn) 185
實(shí)驗(yàn)2 血清中免疫球蛋白IgG和IgM的測定 187
（二）特異性細(xì)胞免疫反應(yīng) 187
實(shí)驗(yàn)1 淋巴細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn) 187
實(shí)驗(yàn)2 遲發(fā)型過敏反應(yīng)（delayed-type hypersensi-tivity，DTH） 188
實(shí)驗(yàn)3 細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞（cytotoxic T lymphocyte，CTL）活性的測定 189
（三）非特異性細(xì)胞免疫反應(yīng) 189
實(shí)驗(yàn)1 NK細(xì)胞活性檢測（乳酸脫氫酶釋放法） 189
實(shí)驗(yàn)2 巨噬細(xì)胞吞噬能力檢測 190
六、思考題 191
實(shí)驗(yàn)十五 血液毒性研究與實(shí)驗(yàn)技術(shù) 192
一、教學(xué)目的與意義 192
二、背景資料 192
三、案
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