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醫學免疫學與微生物學實驗指導 版權信息
- ISBN：9787308045667
- 條形碼：9787308045667 ; 978-7-308-04566-7
- 裝幀：一般膠版紙
- 冊數：暫無
- 重量：暫無
- 所屬分類：>>
醫學免疫學與微生物學實驗指導 本書特色
全書分為兩篇，**篇醫學免疫學實驗，以培養學生的基本技能為原則編寫了免疫學中常規使用的基本扭虧為盈，共14個實驗；第二篇醫學微生物學實驗，包括細菌學、真勞學和病毒學，共26個，書末附有醫學免疫學與微生物學實驗教料和試劑的制備方法有常行殊染色方法。本書可供臨床醫學、預防醫學、口腔醫學、醫學檢驗、藥學及護理學等專業、專科醫學董的實驗課作用，并可作為醫學免疫學和病原生物學專業研究生的實驗參考書籍。各不同專業可以根據各自專教學大綱的要求、實驗條件及專業的特點，選擇進行。
醫學免疫學與微生物學實驗指導 內容簡介
《醫學免疫學與微生物學實驗指導/面向21世紀高等醫藥院校精品課程教材》分為兩篇，第1篇醫學免疫學實驗，以培養學生的基本技能為原則編寫了免疫學中常規使用的基本扭虧為盈，共14個實驗；第二篇醫學微生物學實驗，包括細菌學、真勞學和病毒學，共26個，書末附有醫學免疫學與微生物學實驗教料和試劑的制備方法有常行殊染色方法。本書可供臨床醫學、預防醫學、口腔醫學、醫學檢驗、藥學及護理學等專業、專科醫學董的實驗課作用，并可作為醫學免疫學和病原生物學專業研究生的實驗參考書籍。各不同專業可以根據各自專教學大綱的要求、實驗條件及專業的特點，選擇進行。
醫學免疫學與微生物學實驗指導 目錄
實驗須知
**篇 醫學免疫學實驗
實驗一 凝集反應
一、ABO血型測定（玻片凝集反應）
二、試管凝集反應
實驗二 沉淀反應
一、雙向免疫瓊脂擴散
二、對流免疫電泳技術
三、單向免疫瓊脂擴散試驗
四、免疫電泳
實驗三 巨噬細胞吞噬功能檢測
實驗四 溶血空斑試驗（小室液相法）
實驗五 T、B淋巴細胞分離技術
一、磁珠分離法
二、流式細胞儀分離法
實驗六 E玫瑰花環形成實驗（外周血T淋巴細胞分離技術）
實驗七 T淋巴細胞轉化試驗
實驗八 酶聯免疫吸附試驗（ELISA）
一、ELISA間接法
二、ELISA雙抗體夾心法
三、ELISA雙位點一步法
實驗九 B淋巴細胞抗原識別受體（SmIg ）的檢測（直接免疫熒光法）
實驗十 白細胞介素2 的測定
一、３H-TdR摻入法
二、MTT（四甲基偶氮唑鹽）法
實驗十一 NK細胞殺傷功能測定
實驗十二 雜交瘤技術（單克隆抗體制備）
一、細胞融合前準備
二、細胞融合選擇雜交瘤細胞
三、抗體的檢測
四、雜交瘤的克隆化和凍存
五、單克隆抗體的大量生產
六、單克隆抗體的鑒定
七、影響因素、失敗原因分析
實驗十三 免疫血清的制備
實驗十四 細胞凋亡檢測
一、Annexin-Ⅴ-FITC單染法
二、形態學檢測法
三、線粒體膜勢能的檢測
四、DNA片斷化檢測
五、TUNEL法
六、caspase-3活性的檢測
七、Annexin-Ⅴ和PI雙染法
第二篇 醫學微生物學實驗
實驗十五 電子顯微鏡的原理與使用方法
一、電子顯微鏡的原理
二、超薄切片樣品的制備
三、樣品負染技術
實驗十六 細菌的形態與結構
一、顯微鏡油鏡使用法
二、細菌的形態觀察
實驗十七 細菌不染色標本觀察法
實驗十八 細菌的染色標本檢查法
一、單染色法
二、革蘭染色法（Gram’s染色法）
三、抗酸染色法
實驗十九 細菌的特殊結構染色方法
一、莢膜染色法
二、芽胞染色法
三、鞭毛染色法
實驗二十 細菌的人工培養方法
一、常用培養基的制備
二、細菌人工培養的接種方法
三、細菌生化反應
實驗二十一 細菌的分布
一、自然環境中細菌的檢查
二、正常人體的細菌檢查
實驗二十二 外界因素對細菌的影響
一、物理因素對細菌的影響
二、化學因素對細菌的影響
三、細菌對抗生素的敏感性測定（瓊脂擴散法）
實驗二十三 病原菌的致病性實驗
一、透明質酸酶的擴散作用
二、破傷風梭菌外毒素的毒性作用
三、血漿凝固酶試驗
四、內毒素測定與鱟試驗
實驗二十四 體液的殺菌作用
一、溶菌酶試驗
二、正常血清的殺菌作用
實驗二十五 病原性球菌
一、葡萄球菌、鏈球菌、肺炎球菌、腦膜炎球菌和淋球菌的形態及染色性
二、葡萄球菌、鏈球菌及肺炎球菌培養特性
三、抗鏈球菌溶血毒素“O”試驗
實驗二十六 化膿性球菌膿汁的檢查
實驗二十七 腸道桿菌
一、腸道桿菌的形態及染色性
二、腸道桿菌培養特性
三、腸道桿菌的生化反應
實驗二十八 糞便標本中致病性腸道桿菌的分離與鑒定
實驗二十九 需氧芽胞桿菌
一、炭疽桿菌和枯草桿菌的生物學特性
二、炭疽桿菌串珠實驗
實驗三十 厭氧芽胞梭菌
一、破傷風梭菌、產氣莢膜梭菌與肉毒梭菌的形態及染色性
二、產氣莢膜梭菌的“洶涌發酵”試驗
三、產氣莢膜梭菌動物試驗
四、厭氧培養法
實驗三十一 棒狀桿菌
一、白喉棒狀桿菌形態及培養物觀察
二、白喉棒狀桿菌的Albert 法染色
實驗三十二 分枝桿菌
一、結核桿菌的培養特征
二、肺結核患者痰標本的直接涂片檢查
實驗三十三 立克次體
一、立克次體的形態與染色性（示教）
二、血清學診斷方法——外斐（Weil-Pelix）反應
實驗三十四 螺旋體
一、螺旋體形態（示教）
二、暗視野顯微觀察鉤端螺旋體的活動力
實驗三十五 真 菌
一、真菌基本形態及菌落特點
二、淺部真菌病臨床標本直接鏡檢方法
實驗三十六 病毒的形態學特點
一、病毒的形態（示教）
二、狂犬病毒內基（Negri）包涵體（示教）
實驗三十七 病毒的培養方法
一、動物接種法
二、雞胚培養法
三、病毒組織培養法
實驗三十八 流感病毒的血凝與血凝抑制試驗
一、血凝試驗
二、血凝抑制試驗
實驗三十九 質粒DNA 提取及瓊脂糖凝膠電泳
一、堿變性法提取質粒
二、瓊脂糖凝膠電泳
實驗四十 耐藥質粒DNA 轉化實驗
一、感受態菌的制備
二、質粒轉化
附錄一 常用免疫學試劑的配制方法
附錄二 常用染色液的配制方法
附錄三 常用培養基的制備方法
**篇 醫學免疫學實驗
實驗一 凝集反應
一、ABO血型測定（玻片凝集反應）
二、試管凝集反應
實驗二 沉淀反應
一、雙向免疫瓊脂擴散
二、對流免疫電泳技術
三、單向免疫瓊脂擴散試驗
四、免疫電泳
實驗三 巨噬細胞吞噬功能檢測
實驗四 溶血空斑試驗（小室液相法）
實驗五 T、B淋巴細胞分離技術
一、磁珠分離法
二、流式細胞儀分離法
實驗六 E玫瑰花環形成實驗（外周血T淋巴細胞分離技術）
實驗七 T淋巴細胞轉化試驗
實驗八 酶聯免疫吸附試驗（ELISA）
一、ELISA間接法
二、ELISA雙抗體夾心法
三、ELISA雙位點一步法
實驗九 B淋巴細胞抗原識別受體（SmIg ）的檢測（直接免疫熒光法）
實驗十 白細胞介素2 的測定
一、３H-TdR摻入法
二、MTT（四甲基偶氮唑鹽）法
實驗十一 NK細胞殺傷功能測定
實驗十二 雜交瘤技術（單克隆抗體制備）
一、細胞融合前準備
二、細胞融合選擇雜交瘤細胞
三、抗體的檢測
四、雜交瘤的克隆化和凍存
五、單克隆抗體的大量生產
六、單克隆抗體的鑒定
七、影響因素、失敗原因分析
實驗十三 免疫血清的制備
實驗十四 細胞凋亡檢測
一、Annexin-Ⅴ-FITC單染法
二、形態學檢測法
三、線粒體膜勢能的檢測
四、DNA片斷化檢測
五、TUNEL法
六、caspase-3活性的檢測
七、Annexin-Ⅴ和PI雙染法
第二篇 醫學微生物學實驗
實驗十五 電子顯微鏡的原理與使用方法
一、電子顯微鏡的原理
二、超薄切片樣品的制備
三、樣品負染技術
實驗十六 細菌的形態與結構
一、顯微鏡油鏡使用法
二、細菌的形態觀察
實驗十七 細菌不染色標本觀察法
實驗十八 細菌的染色標本檢查法
一、單染色法
二、革蘭染色法（Gram’s染色法）
三、抗酸染色法
實驗十九 細菌的特殊結構染色方法
一、莢膜染色法
二、芽胞染色法
三、鞭毛染色法
實驗二十 細菌的人工培養方法
一、常用培養基的制備
二、細菌人工培養的接種方法
三、細菌生化反應
實驗二十一 細菌的分布
一、自然環境中細菌的檢查
二、正常人體的細菌檢查
實驗二十二 外界因素對細菌的影響
一、物理因素對細菌的影響
二、化學因素對細菌的影響
三、細菌對抗生素的敏感性測定（瓊脂擴散法）
實驗二十三 病原菌的致病性實驗
一、透明質酸酶的擴散作用
二、破傷風梭菌外毒素的毒性作用
三、血漿凝固酶試驗
四、內毒素測定與鱟試驗
實驗二十四 體液的殺菌作用
一、溶菌酶試驗
二、正常血清的殺菌作用
實驗二十五 病原性球菌
一、葡萄球菌、鏈球菌、肺炎球菌、腦膜炎球菌和淋球菌的形態及染色性
二、葡萄球菌、鏈球菌及肺炎球菌培養特性
三、抗鏈球菌溶血毒素“O”試驗
實驗二十六 化膿性球菌膿汁的檢查
實驗二十七 腸道桿菌
一、腸道桿菌的形態及染色性
二、腸道桿菌培養特性
三、腸道桿菌的生化反應
實驗二十八 糞便標本中致病性腸道桿菌的分離與鑒定
實驗二十九 需氧芽胞桿菌
一、炭疽桿菌和枯草桿菌的生物學特性
二、炭疽桿菌串珠實驗
實驗三十 厭氧芽胞梭菌
一、破傷風梭菌、產氣莢膜梭菌與肉毒梭菌的形態及染色性
二、產氣莢膜梭菌的“洶涌發酵”試驗
三、產氣莢膜梭菌動物試驗
四、厭氧培養法
實驗三十一 棒狀桿菌
一、白喉棒狀桿菌形態及培養物觀察
二、白喉棒狀桿菌的Albert 法染色
實驗三十二 分枝桿菌
一、結核桿菌的培養特征
二、肺結核患者痰標本的直接涂片檢查
實驗三十三 立克次體
一、立克次體的形態與染色性（示教）
二、血清學診斷方法——外斐（Weil-Pelix）反應
實驗三十四 螺旋體
一、螺旋體形態（示教）
二、暗視野顯微觀察鉤端螺旋體的活動力
實驗三十五 真 菌
一、真菌基本形態及菌落特點
二、淺部真菌病臨床標本直接鏡檢方法
實驗三十六 病毒的形態學特點
一、病毒的形態（示教）
二、狂犬病毒內基（Negri）包涵體（示教）
實驗三十七 病毒的培養方法
一、動物接種法
二、雞胚培養法
三、病毒組織培養法
實驗三十八 流感病毒的血凝與血凝抑制試驗
一、血凝試驗
二、血凝抑制試驗
實驗三十九 質粒DNA 提取及瓊脂糖凝膠電泳
一、堿變性法提取質粒
二、瓊脂糖凝膠電泳
實驗四十 耐藥質粒DNA 轉化實驗
一、感受態菌的制備
二、質粒轉化
附錄一 常用免疫學試劑的配制方法
附錄二 常用染色液的配制方法
附錄三 常用培養基的制備方法
展開全部
醫學免疫學與微生物學實驗指導 節選
三、抗體的檢測 篩選雜交瘤細胞通過選擇性培養而獲得雜交細胞系中，僅少數能分泌針對免疫原的特異性抗體。一般在雜交瘤細胞布滿孔底1／10面積時，即可開始檢測特異性抗體，篩選出所需要的雜交瘤細胞系。 應根據抗原的性質、抗體的類型不同，選擇不同的篩選方法，一般以快速、簡便、特異、敏感的方法為首選。 常用的方法有： 1．EuSA，用于可溶性抗原（蛋白質）、細胞和病毒等McAb的檢測。 2．RIA，用于可溶性抗原、細胞入McAb的檢測！ 3．FACS（熒光激活細胞分類儀），用于細胞表面抗原McAb的檢測！ 4．IFA，用于細胞和病毒抗原McAb的檢測！ ∩鲜龇椒ň鶠橐话銓嶒炇业某Ｒ幏椒，故在此不介紹具體的實驗過程。 可靠的篩選方法必須在融合前建立，避免由于方法不當貽誤整個篩選時機。 四、雜交瘤的克隆化和凍存 克隆化一般是指將目的抗體陽性孔進行克隆化。因為經過HAT篩選后的雜交瘤克隆不能保證一個孔內只有一個克隆，可能會有數個甚至更多的克隆。要想將這些多個克隆細胞彼此分開，就需要克隆化？寺』脑瓌t是，對于目的抗體陽性的雜交克隆應盡早進行克隆化，否則目的抗體分泌細胞會被抗體非分泌細胞所抑制，因為抗體非分泌細胞的生長速度比目的抗體分泌細胞的生長速度快，兩者競爭的結果會使目的抗體分泌細胞丟失。即使克隆化過的雜交瘤細胞也需要定期地再克隆，以防止雜交瘤細胞的突變或染色體丟失，從而喪失產生抗體的能力。 。ㄒ唬╇s交瘤細胞克隆化方案 克隆化的方法很多，*常用的就是有限稀釋法和軟瓊脂平板法！ 1．有限稀釋法 。1）制備飼養細胞懸液（同融合前準備）！ 。2）陽性孔細胞的計數，并調整細胞數在（1—5）×10／m1！ 。3）取130個細胞放人6．5ml含飼養細胞完全培養液，即20個細胞／ml，100ul／孔，加A、B、C三排，為每孑L 2個細胞。余下2．9ml細胞懸液補加2．9ml含飼養細胞的完全培養液，細胞數為10個／ml，100ul／孔，加D、E、F三排，為每孔1個細胞。余下2．2ml細胞懸液補加2．2ml含飼養細胞的完全培養液，細胞數5個／ml，100／ul／孔，加G、H兩排，為每孔0．5個細胞！ 。4）培養4—5天后，在倒置顯微鏡上可見到小的細胞克隆，補加完全培養液200／xl／孔！ 。5）第8—9天時，肉眼可見細胞克隆，及時進行抗體檢測！ ∽ⅲ撼醮慰寺』碾s交瘤細胞需要在完全培養液中加HT！
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