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基礎醫學實驗教學系列教材醫學細胞分子生物學實驗(第3版)/苑輝卿等

包郵 基礎醫學實驗教學系列教材醫學細胞分子生物學實驗(第3版)/苑輝卿等

出版社:科學出版社出版時間:2017-06-01
開本: 其他 頁數: 264
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基礎醫學實驗教學系列教材醫學細胞分子生物學實驗(第3版)/苑輝卿等 版權信息

基礎醫學實驗教學系列教材醫學細胞分子生物學實驗(第3版)/苑輝卿等 本書特色

本教材采取“虛實結合”的方式,系統介紹研究生物分子和細胞所需要的基本實驗技術和方法、綜合分析問題的思路,并設計開放式問題引導學生對生命問題進行科學探索的意識。教材以實踐操作內容為主線,涵蓋醫學細胞生物學、生物化學、分子生物學以及遺傳學的基本知識,通過對某一問題的驗證分析,介紹研究的基本方法、技術以及常用儀器設備的使用等,并增加了彩圖照片、實驗操作的視頻資料和虛擬實驗的內容。另外,本教材繼續保持第二版的特點,設置綜合實驗和開放式實驗設計,使學生能靈活運用不同學科的基本實驗方法進行探討,避免知識的碎片化。同時通過表達綠色熒光蛋白,對分子生物學的內容進行更新。作為融合性較強的實驗教材中,將相關學科的實驗內容通過文字、視頻資料以及信息平臺綜合呈現出來,適合當前如PBL、慕課等醫學改革模式,是實用性和先進性并存的教學用書。

基礎醫學實驗教學系列教材醫學細胞分子生物學實驗(第3版)/苑輝卿等 內容簡介

本教材分為基本實驗、綜合實驗、創新實驗、實驗視頻錄像、虛擬實驗以及附錄;緦嶒灢糠窒到y介紹了細胞生物學、生物化學、分子生物學和醫學遺傳學的基本實驗技術原理和方法,并根據學科發展前沿,以及實驗平臺儀器的更新換代和高端儀器的配置情況,更新了分子生物學的全部實驗內容,同時對部分實驗進行更新替換。綜合實驗部分是根據科學問題而設置,所采用的實驗技術方法融合了三個學科的相關內容,

基礎醫學實驗教學系列教材醫學細胞分子生物學實驗(第3版)/苑輝卿等 目錄

目錄 **篇 基礎實驗 **章 醫學細胞生物學基本實驗 1 **節 細胞的顯微結構 1 實驗一 細胞的一般形態結構觀察 1 實驗二 細胞的顯微測量技術 6 第二節 細胞生理活動 8 實驗三 胞質環流 8 實驗四 細胞吞噬 9 實驗五 細胞活性鑒定 11 實驗六 細胞融合 12 第三節 細胞化學成分的顯示 14 實驗七 普通細胞化學 15 實驗八 核酸細胞化學 21 實驗九 酶細胞化學 25 實驗十 熒光細胞化學與免疫熒光細胞化學 28 第四節 細胞增殖 34 實驗十一 無絲分裂 34 實驗十二 有絲分裂 35 實驗十三 減數分裂 39 實驗十四 X染色質標本制備與觀察 42 實驗十五 早熟染色體凝集的誘導和觀察 43 第五節 細胞培養 46 實驗十六 原代細胞培養 47 實驗十七 細胞傳代培養 49 實驗十八 體外培養細胞的觀察方法 53 第二章 醫學生物化學基本實驗 59 **節 蛋白定量分析實驗 59 實驗一 雙縮脲法測定蛋白質含量 59 實驗二 Folin-酚試劑法測定蛋白質含量 60 實驗三 考馬斯亮藍法測定蛋白質含量 61 實驗四 紫外分光光度法測定蛋白質含量 62 第二節 層析分離純化實驗 64 實驗五 血清γ-球蛋白的分離純化與鑒定 64 實驗六 葡聚糖凝膠分離血紅蛋白和DNP-胰糜蛋白酶混合液 67 實驗七 離子交換層析分離混合氨基酸 68 第三節 電泳分析實驗 69 實驗八 血清蛋白質醋酸纖維素薄膜電泳 69 實驗九 血漿脂蛋白瓊脂糖凝膠電泳 71 實驗十 聚丙烯酰胺凝膠電泳分離血清LDH同工酶 72 實驗十一 SDS-PAGE測定蛋白質分子量 75 實驗十二 等電聚焦法測定蛋白質等電點 77 第四節 酶學實驗 79 實驗十三 pH對酶促反應速度的影響 79 實驗十四 溫度對酶促反應速度的影響 82 實驗十五 底物濃度對酶促反應速度的影響 83 實驗十六 抑制劑對酶促反應速度的影響 85 實驗十七 酶的提取及比活性測定 87 第五節 物質代謝實驗 92 實驗十八 胰島素對血糖含量的影響 92 實驗十九 鄰甲苯胺法測血糖含量 92 實驗二十 糖酵解中間產物的鑒定 93 實驗二十一 血清中谷丙轉氨酶活性的測定 95 實驗二十二 血清脂類含量分析 97 第三章 醫學分子生物學基本實驗 100 **節 基因克隆實驗 100 實驗一 質粒DNA的限制性酶切反應 101 實驗二 瓊脂糖凝膠電泳分離鑒定酶切的線性DNA片段 104 實驗三 DNA酶切片段的回收 107 實驗四 DNA片段的體外連接 109 實驗五 大腸桿菌感受態細胞的制備 111 實驗六 重組DNA的轉化及陽性克隆的初步篩選 112 實驗七 陽性重組子的鑒定 114 實驗八 堿裂解法質粒DNA的小量制備 115 實驗九 質粒DNA濃度和純度的測定 117 第二節 外源基因GFP在原核細胞中的誘導表達和純化 117 實驗十 外源基因在大腸桿菌的誘導表達和提取 118 實驗十一 親和層析法純化重組蛋白 119 實驗十二 SDS-PAGE鑒定重組蛋白質 119 第三節 PCR技術 121 實驗十三 PCR擴增目的基因 123 實驗十四 總RNA提取及RT-PCR擴增目的基因 124 實驗十五 實時定量PCR分析真核基因的表達 128 第四章 醫學遺傳學基本實驗 130 **節 細胞遺傳學實驗 130 實驗一 人類外周血淋巴細胞培養 130 實驗二 人類外周血淋巴細胞染色體的制備 131 實驗三 人類染色體G顯帶 133 實驗四 人類G顯帶染色體核型分析 134 實驗五 姐妹染色單體交換(SCE)標本的制備與觀察 136 第二節 分子遺傳學實驗 138 實驗六 短串聯重復序列(STR)的多態性分析 138 實驗七 限制性片段長度多態(RFLP)分析 143 實驗八 單鏈構象多態性(SSCP)的檢測 145 第三節 人類遺傳性狀分析 148 實驗九 遺傳性狀基因型與表型分析 148 實驗十 遺傳病的家系分析和再發風險估計 151 第二篇 綜合實驗 第五章 細胞增殖活力分析 153 **節 細胞增殖的定量分析 153 實驗一 細胞琥珀酸脫氫酶活性檢測(MTT法) 153 實驗二 細胞周期的檢測 154 第二節 細胞內ATP含量測定 155 實驗三 人淋巴細胞ATP活力檢測 155 第三節 細胞增殖的染色分析 156 實驗四 BrdU染色法檢測細胞增殖 156 實驗五 Ki-67免疫染色法檢測細胞增殖 157 第六章 細胞凋亡的誘導與檢測 160 **節 細胞凋亡的誘導與形態結構觀察 160 實驗一 培養細胞的凋亡誘導 161 實驗二 錐蟲藍染色檢測凋亡細胞 162 實驗三 蘇木精-伊紅染色檢測凋亡細胞 163 實驗四 Giemsa染色檢測凋亡細胞 164 實驗五 吖啶橙熒光染色檢測凋亡細胞 165 實驗六 Ho.33342與PI熒光雙染檢測凋亡細胞 165 第二節 凋亡細胞的超微結構觀察 167 實驗七 透射電鏡觀察凋亡細胞 167 實驗八 掃描電鏡觀察凋亡細胞 168 第三節 凋亡細胞的定量分析 169 實驗九 流式細胞術檢測凋亡細胞 169 第四節 細胞凋亡的分子生物學特征 171 實驗十 凋亡細胞DNA ladder檢測 172 實驗十一 Caspase 3酶活性測定 172 實驗十二 凋亡相關蛋白表達水平檢測 173 實驗十三 凋亡相關基因轉錄水平的表達檢測 174 第七章 細胞自噬與相關分析 178 **節 細胞自噬的形態學分析 178 實驗一 透射電鏡觀察自噬體的形成 179 實驗二 GFP-LC3自噬斑點的熒光顯微鏡檢測 180 第二節 自噬標志蛋白的表達分析 181 實驗三 蛋白質印跡法檢測自噬標志蛋白的變化 181 第八章 真核生物基因表達調控分析 183 實驗一 甲基化特異性PCR(MSP)檢測基因啟動子甲基化 183 實驗二 熒光素酶報告基因瞬時轉染分析啟動子活性 186 第九章 四氯化碳致培養肝細胞損傷的分析 193 **節 培養肝細胞損傷模型的誘導與形態學分析 193 實驗一 肝細胞損傷的誘導及常規形態檢查 193 實驗二 損傷細胞的脂肪變性檢測 194 第二節 肝細胞損傷的定量分析 195 實驗三 CCK法檢測細胞存活率 196 第三節 損傷肝細胞相關酶的分析 197 實驗四 肝損傷細胞乳酸脫氫酶活性檢測 198 實驗五 肝損傷細胞谷丙轉氨酶活性檢測 199 實驗六 肝細胞中PPAR γ1表達水平的檢測 201 第十章 人遺傳性狀基因的分子診斷與應用 201 實驗一 Duchenne型肌營養不良的基因診斷 201 實驗二 多重RT-PCR檢測染色體易位 202 實驗三 利用短串聯重復序列進行親權鑒定 205 第三篇 創新實驗 實驗一 糖尿病的生化及遺傳檢測分析實驗 207 實驗二 唐氏綜合征的產前診斷方法 208 實驗三 家族性高膽固醇血癥的診斷方法 208 實驗四 血友病的診斷 210 實驗五 重組人促紅細胞生成素在細胞中的表達、分離和純化 210 實驗六 p53基因與腫瘤相關性實驗設計 211 實驗七 小鼠組織細胞形態及功能分析 212 實驗八 小鼠組織特種細胞的形態及特征性成分的鑒定 212 附錄 附錄一 實驗室規則 213 附錄二 實驗室安全及防護 213 附錄三 實驗室常用玻璃儀器的洗滌與清潔 214 附錄四 生物繪圖的要求與方法 217 附錄五 生物學實驗設計報告 218 附錄六 常用實驗技術原理 218
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