實(shí)用神經(jīng)變性疾病生物學(xué)實(shí)驗(yàn)方法與技術(shù) 版權(quán)信息
- ISBN:9787122276018
- 條形碼:9787122276018 ; 978-7-122-27601-8
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實(shí)用神經(jīng)變性疾病生物學(xué)實(shí)驗(yàn)方法與技術(shù) 本書特色
實(shí)驗(yàn)前該準(zhǔn)備哪些試劑?怎么配制實(shí)驗(yàn)試劑?實(shí)驗(yàn)前該準(zhǔn)備哪些儀器?怎么培養(yǎng)海馬神經(jīng)元?怎么觀察神經(jīng)元的形態(tài)學(xué)?怎么鑒定神經(jīng)元?怎么培養(yǎng)小鼠中腦多巴胺能神經(jīng)元?怎么培養(yǎng)神經(jīng)干細(xì)胞?怎么培養(yǎng)原代神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞?怎么測定小膠質(zhì)細(xì)胞趨化、遷移、吞噬功能?怎么測試實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的學(xué)習(xí)和記憶?怎么檢測基因芯片?怎么做神經(jīng)免疫組織化學(xué)和免疫熒光染色?怎么應(yīng)用image j 神經(jīng)生物分析軟件、graphpad prism 6.0軟件、spss軟件?……本書圖文結(jié)合予一一介紹。實(shí)驗(yàn)流程嚴(yán)格按照美國國立衛(wèi)生研究院(nih)、國立老化研究所(nia)的標(biāo)準(zhǔn)、規(guī)范執(zhí)行。內(nèi)容實(shí)用,具有可操作性。本書適合從事神經(jīng)病學(xué)研究的人員,如神經(jīng)內(nèi)科、神經(jīng)外科醫(yī)師、研究生、醫(yī)學(xué)院校基礎(chǔ)研究人員,特別適合初學(xué)者閱讀參考。
實(shí)用神經(jīng)變性疾病生物學(xué)實(shí)驗(yàn)方法與技術(shù) 內(nèi)容簡介
實(shí)驗(yàn)流程嚴(yán)格按照美國國立衛(wèi)生研究院(nih)、國立老化研究所(nia)的標(biāo)準(zhǔn)、規(guī)范執(zhí)行包括實(shí)驗(yàn)技術(shù)的概述,材料準(zhǔn)備、操作步驟、操作指導(dǎo)、思考、注意事項(xiàng)(包括實(shí)驗(yàn)結(jié)果不是想要的時(shí)的應(yīng)急預(yù)案)、失敗的經(jīng)驗(yàn)或成功的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)等圖文結(jié)合介紹image j 神經(jīng)生物分析軟件、graphpad prism 6.0軟件、spss軟件的應(yīng)用按本書的指導(dǎo),可以提高實(shí)驗(yàn)效率,分析統(tǒng)計(jì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
實(shí)用神經(jīng)變性疾病生物學(xué)實(shí)驗(yàn)方法與技術(shù) 目錄
**章 原代神經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)和細(xì)胞功能測定 / 1**節(jié) 原代皮質(zhì)和海馬神經(jīng)元培養(yǎng) 1第二節(jié) 新生小鼠中腦多巴胺能神經(jīng)元培養(yǎng) 3一、單層皮質(zhì)星形膠質(zhì)細(xì)胞表面培養(yǎng)新生鼠中腦多巴胺能神經(jīng)元 3二、單層星形膠質(zhì)細(xì)胞表面培養(yǎng)新生鼠中腦多巴胺能神經(jīng)元及形成 神經(jīng)突觸 9三、本節(jié)實(shí)驗(yàn)中使用到的試劑和溶液 11四、注意事項(xiàng) 13五、常見問題及解決方案 13六、預(yù)期結(jié)果 13七、時(shí)間因素 14第三節(jié) 小鼠神經(jīng)干細(xì)胞培養(yǎng) 14一、成年鼠神經(jīng)干細(xì)胞培養(yǎng) 14二、新生鼠海馬神經(jīng)干細(xì)胞的培養(yǎng) 19三、胎鼠神經(jīng)干細(xì)胞的培養(yǎng) 20第四節(jié) 原代神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng) 21一、星形膠質(zhì)細(xì)胞的分離和培養(yǎng) 21二、新生鼠小膠質(zhì)細(xì)胞的原代培養(yǎng) 23三、成年鼠小膠質(zhì)細(xì)胞的分離和培養(yǎng) 25第五節(jié) 小膠質(zhì)細(xì)胞功能實(shí)驗(yàn) 29一、趨化和遷移實(shí)驗(yàn) 29二、體外測定小膠質(zhì)細(xì)胞吞噬功能(吞噬尼羅紅微球/a突觸核蛋白/ab) 30第二章 模式動(dòng)物行為學(xué)實(shí)驗(yàn) / 34**節(jié) morris水迷宮 34第二節(jié) y-迷宮 36第三節(jié) 小鼠平衡功能實(shí)驗(yàn) 39第四節(jié) 抑郁模型的建立和評定 40一、抑郁癥的模型制作 41二、抑郁動(dòng)物的行為學(xué)評價(jià) 45第五節(jié) 嗅覺行為功能測定 47一、埋藏食物小球?qū)嶒?yàn) 48二、嗅覺迷宮 48第六節(jié) 大腦中動(dòng)脈閉塞模型的建立和評定 49第七節(jié) 運(yùn)動(dòng)功能評定 52一、小鼠肢體力量測試實(shí)驗(yàn)——小鼠抓力測試 52二、小鼠耐力測試實(shí)驗(yàn)——跑臺實(shí)驗(yàn) 53第八節(jié) 感覺(痛觸覺)系統(tǒng)評估 54一、von frey test 54二、智能熱板儀 56三、甩尾實(shí)驗(yàn) 57第三章 神經(jīng)病理學(xué)實(shí)驗(yàn) / 59**節(jié) 腦組織的取材、保存和標(biāo)本制作 59第二節(jié) 脊髓組織的取材、保存和標(biāo)本制作 62一、脊髓的取材和保存 62二、 脊髓冰凍切片的制作 64第三節(jié) 小鼠腦脊液采集 66第四節(jié) 海馬腦片場電位的神經(jīng)電生理記錄方法 67第五節(jié) 神經(jīng)免疫組織化學(xué)和免疫熒光染色 71第六節(jié) 透視電鏡標(biāo)本制作 74第七節(jié) 老化組織相關(guān)病理特殊染色(sa-b-gal 、銀染色) 77一、神經(jīng)原纖維纏結(jié)(nfts)染色 77二、b-淀粉樣蛋白染色 80三、衰老相關(guān)b-半乳糖苷酶染色 82第八節(jié) 神經(jīng)組織高爾基染色 83第九節(jié) 神經(jīng)組織體視學(xué)分析技術(shù) 86第十節(jié) 共聚焦掃描及定量技術(shù) 92一、激光共聚焦顯微鏡的成像原理 92二、激光共聚焦顯微鏡在神經(jīng)變性疾病研究中的運(yùn)用 93三、激光共聚焦顯微鏡結(jié)構(gòu) 95四、基本掃描及圖像獲取 95五、微分干涉差(dic)掃描及圖像獲取 102六、拼圖掃描及圖像獲取 103七、z-stack掃描及圖像獲取 103八、時(shí)間序列掃描 105九、激光共聚焦圖像定量及后處理 106第四章 神經(jīng)生化和基因檢測 / 115**節(jié) 轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的基因型鑒定、保種和管理 115一、小鼠生殖生理 115二、小鼠的生長周期 116三、基因工程鼠飼養(yǎng)繁殖一般流程和注意事項(xiàng) 116四、常用小鼠品系的概況 117五、幾種常用神經(jīng)變性疾病轉(zhuǎn)基因鼠的介紹和鑒定 118第二節(jié) 神經(jīng)組織蛋白檢測 125一、蛋白質(zhì)印跡法 125二、免疫共沉淀原理及步驟 130三、動(dòng)物腦組織勻漿檢測ab 132第三節(jié) rna提取及實(shí)時(shí)熒光定量pcr技術(shù) 134一、rna提取 134二、rt-pcr 135三、qpcr 135第四節(jié) 基因芯片檢測 140一、單核苷酸多態(tài)性芯片實(shí)驗(yàn) 140二、基因表達(dá)譜芯片檢測 142第五節(jié) 熒光素酶報(bào)告基因技術(shù)分析啟動(dòng)子轉(zhuǎn)錄活性 143第六節(jié) 熒光定量pcr法檢測端粒酶活性 146第七節(jié) 中樞神經(jīng)系統(tǒng)突觸和非突觸線粒體的分離提取 148第五章 分子影像技術(shù)檢測神經(jīng)變性疾病 / 157**節(jié) pet/spect-ct顯像探針的制備 158第二節(jié) fmri成像技術(shù)的原理及其實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)與數(shù)據(jù)處理 164一、fmri實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì) 164二、實(shí)驗(yàn)設(shè)備 166三、實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)處理 166四、fmri實(shí)驗(yàn)相關(guān)的準(zhǔn)備 169五、小結(jié) 170第六章 神經(jīng)變性疾病患者臨床神經(jīng)評估、樣本保存和數(shù)據(jù)庫建設(shè) / 171**節(jié) 神經(jīng)變性疾病臨床登記和數(shù)據(jù)庫建立和實(shí)施 171一、臨床研究目標(biāo)的確立 171二、研究方案的確立 172三、組織機(jī)構(gòu)的建立 173四、病例報(bào)告表(crf)的建立 174第二節(jié) 神經(jīng)變性疾病患者血液、腦脊液組織樣本的保存和處理 177一、血液及血液成分的處理和保存 178二、腦脊液的處理和保存 179三、標(biāo)本dna的提取和保存 180 附表6-1 標(biāo)本保存詳細(xì)記錄 180 附表6-2 關(guān)于使用組織樣本開展科學(xué)研究的知情同意書 181第三節(jié) 神經(jīng)心理認(rèn)知障礙測試診斷系統(tǒng) 182一、醫(yī)生端系統(tǒng) 182二、用戶管理 183三、臨床病例登記 183四、案例管理 186五、統(tǒng)計(jì)打印 190六、量表管理 191第七章 神經(jīng)生物學(xué)常用分析及作圖軟件的應(yīng)用 / 193**節(jié) image j神經(jīng)生物分析軟件的應(yīng)用 193一、 image j神經(jīng)生物分析軟件的基本功能 193二、 image j神經(jīng)生物分析軟件分析免疫熒光定量技術(shù) 197第二節(jié) graphpad prism 6.0作圖和統(tǒng)計(jì)應(yīng)用 205一、折線圖 205二、直條圖 208三、生存曲線圖 216四、散點(diǎn)圖 219五、餅圖 225第三節(jié) logistic回歸、cox風(fēng)險(xiǎn)模型以及kaplan-meier曲線的統(tǒng)計(jì)應(yīng)用 231一、logistic回歸分析和roc工作曲線的制訂 231二、 cox回歸分析 238三、kaplan-meier曲線分析 242第四節(jié) endnote×7的應(yīng)用 245一、文獻(xiàn)管理 245二、論文撰寫 245
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實(shí)用神經(jīng)變性疾病生物學(xué)實(shí)驗(yàn)方法與技術(shù) 作者簡介
潘曉東,醫(yī)學(xué)博士,副主任醫(yī)師、副教授、博士生導(dǎo)師。福建省老年醫(yī)學(xué)研究所副所長,福建省醫(yī)學(xué)會(huì)神經(jīng)病學(xué)分會(huì)秘書及青年委員、神經(jīng)變性學(xué)組成員;福建省青年科學(xué)家學(xué)會(huì)成員;中國老年醫(yī)學(xué)學(xué)會(huì)認(rèn)知障礙分會(huì)委員會(huì)委員;中國研究型醫(yī)院學(xué)會(huì)神經(jīng)科學(xué)專業(yè)委員會(huì)委員;美國國立衛(wèi)生研究院(NIH)/美國國立老化研究所(NIA)訪問學(xué)者。專業(yè)方向:阿爾茨海默病、帕金森病等老年神經(jīng)變性疾病的基礎(chǔ)和臨床研究。近年主持承擔(dān)3項(xiàng)國家自然科學(xué)基金及多項(xiàng)省廳級課題;發(fā)表SCI及國家級論文10余篇;主編專著2部。開發(fā)記憶障礙測試系統(tǒng)軟件,建成神經(jīng)認(rèn)知心理障礙疾病診斷平臺,獲軟件著作權(quán)1項(xiàng)、申請專利1項(xiàng)。2011年獲“福建青年科技獎(jiǎng)”、2013年獲“福建運(yùn)盛青年科技獎(jiǎng)”榮譽(yù)。